CCLM：miRNA在检验医学中的应用—循环miRNA检测中的陷阱

近日，国际杂志Clinical Chemistry and Laboratory Medicine上在线发表一期专辑介绍关于miRNA在检验医学中的应用的研究，阐述了miRNA在疾病病因学，诊断以及治疗中的作用和应用前景。本文主要介绍循环miRNA检测中的陷阱。

miRNA作为有效的诊断工具和疾病预后标志的潜力越来越明显。 然而，该方法的重现性仍然受到样品制备质量的限制。 对循环miRNA在血浆中的溶血率的定量是至关重要的，因为红细胞也包含miRNA。 因此，miRNA从破裂的红血中释放出来细胞（RBC）可以对分析产生重大影响。 例如，miR-92a是一种结肠癌标记物，具有高溶血率样本可能增加20-30倍。 另外，体内溶血存在于类似慢性淋巴细胞白血病等疾病，这可能会导致不正确的血浆miRNA高水平。 未经验证收集的样品，样品制备和疾病诱导的溶血，均会作为分析中普遍存在错误的来源。此外，很少有人知道不同健康受试者血细胞比容水平之间的关系，如血细胞比容水平较高的男性与女性相比，血浆样品溶血率的差异。 唯一的红细胞表达miRNA与血浆中的和受试者特异性血细胞比容值与RBC测量的研究不能检测其之间显著性关系[2]。 所以本研究通过使用光度测量和基于miRNA的测量来评估相关关系。

这项研究的一个重要结果是，样品处理（过滤vs纯血浆）影响miRNA表达。 在纯血浆中，deltaCt在不同性别之间不同，也与RBC参数无关。为降低循环miRNA表达的差异，对血浆样本进行过滤是一项选择，如果研究目标是细胞外miRNA，那么还应该采用二次离心。

研究认为较高的血细胞比容与溶血比率增加相关，此外，由于大多数男性的血细胞比容较高，男性样本受到溶血作用的影响更大。还有，对血浆样品进行优化处理，如过滤或而二次离心，可以减少miRNA测量的异质性和改善miRNA分析的质量。 

原始出处：

Mayr, Barbara, Mueller, Edith E., Schäfer, Christine. et.al. Pitfalls of analysis of circulating miRNA: role of hematocrit. CCLM. 2017

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