Clin Chem:完整的ACTH LC-MS/MS分析可区分临床不一致免疫分析结果

2019-12-23 MedSci MedSci原创

准确测定血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)是鉴别诊断下丘脑-垂体-肾上腺疾病的关键。双位点夹心免疫测定法在北美ACTH临床检测中占主导地位;然而,已有多次报道不同制造商之间会出现不一致结果。为了解决这一差异,研究人员开发了一种液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定方法,用于测定生物活性完整的ACTH (iACTH)。

准确测定血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)是鉴别诊断下丘脑-垂体-肾上腺疾病的关键。双位点夹心免疫测定法在北美ACTH临床检测中占主导地位;然而,已有多次报道不同制造商之间会出现不一致结果。为了解决这一差异,研究人员开发了一种液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定方法,用于测定生物活性完整的ACTH (iACTH)

研究人员采用多重反应监测LC-MS/MS法,有选择地测定全长iACTHACTH类似物和片段(即, ACTH1-24ACTH18-39)。采用MALDI-TOF质谱法对罗氏电子抗体进行表位分配。我们对Roche ElecsysSiemens Immulite ACTH免疫测定法进行了比较,得到了临床一致/不一致的结果。在这些样本的一个子集中,使用LC-MS/MS方法测定iACTH浓度。

iACTH LC-MS/MS测定的下限为9pg /mL (2pmol /L)。实验时间为9 ~ 1938 pg/mL (2 ~ 427 pmol/L)。表位映射显示,罗氏捕获和检测抗体分别与ACTH9-1236-39残基结合。iACTH LC-MS/MS分析表明,两种免疫测定结果不一致,只有Roche结果与iACTH浓度高度正相关。

免疫沉淀法结合LC-MS/MS分析可对血浆中iACTH及相关的生物活性片段进行选择性检测。应用于临床差异结果的调查,该方法可以鉴别iACTH浓度。

原始出处:

Junyan Shi, Pawan Dhaliwal,An Intact ACTH LC-MS/MS Assay as an Arbiter of Clinically Discordant Immunoassay Results

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