Biochemia Medica：分析前变量对临床相关自由循环microRNAs测量的影响
2020-02-17 MedSci MedSci原创
循环microRNA (miRNAs)正在逐渐成为潜在的生物标志物。但是，由于缺乏分析前和分析标准化，因此它们的使用也受到了一定的限制。本研究的目的是根据不同的收集和储存条件，确定不同miRNA在血浆中的表达。
循环microRNA
(miRNAs)正在逐渐成为潜在的生物标志物。但是，由于缺乏分析前和分析标准化，因此它们的使用也受到了一定的限制。本研究的目的是根据不同的收集和储存条件，确定不同miRNA在血浆中的表达。
将10名志愿者的静脉血收集在喷涂了乙二胺四乙酸二钾盐的试管中，通过使用(等离子体制备管，PPT)或不使用(K2EDTA)凝胶分离器。还从K2EDTA血浆中获得了血小板血浆（PPP）。 在不同条件下储存后，从血浆中分离出富含miRNA的总RNA，然后反转录。 通过定量聚合酶链反应测定一组179个miRNA，并通过GenEx软件分析结果，并确定了miRNA的可检测性和稳定性。。
PPT未检测到的mirna数量为18、24、22；K2EDTA中的为83、43和20；而在PPP样品中立即冷冻- 80°C的血浆和室温或4°C储存24小时的血浆分别为76、106和104。PPT样品中循环miRNA表达不受储存延迟或温度的影响，而K2EDTA和PPP样品中上调和下调miRNA的百分比分别为2%、1%至7%和5%。
样品基质、贮存温度和贮存时间对血浆miRNA的表达水平有重要影响。结果表明，PPT管是改善总miRNA可检测性和稳定性的最合适的基质，且与温度无关。
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