SCI REP:上海生科院首次实现TRiC/CCT各亚基在其开环结构中的**定位
2018-02-27 上海生科院 中国生物技术网
近日,中国科学院生物化学与细胞生物学研究所丛尧研究组的最新研究成果,以Development of a yeast internal-subunit eGFP labeling strategy and its application in subunit identification in eukaryotic group II chaperonin TRiC/CCT为题,在线发表在Scient
研究员丛尧带领博士研究生臧云祥及硕士研究生王胡萍等实验室成员,发展了YISEL(yeast internal-subunit eGFP labeling)方法,利用酵母同源重组方法分别在CCT1、CCT2、CCT4、CCT5、CCT6、CCT7亚基的氨基酸序列中间(非N-或者C-末端)插入eGFP标签。通过解析上述带有eGFP标签的TRiC冷冻电镜结构,最终确定了各亚基在其开环结构中的准确定位,解决了一直以来的争议。YISEL方法也为其他超大分子复合体的亚基准确定位提供了新策略。
该工作得到生化与细胞所研究员周金秋、周兆才的支持。研究工作得到了国家蛋白质科学中心(上海)冷冻电镜系统、数据库与计算分析系统、质谱系统、核磁系统、显微镜系统与规模化蛋白质制备系统的支持;并得到国家自然科学基金委、科技部、中科院战略性先导科技专项(B类)、上海大科学中心高端用户项目以及中科院重大科技基础设施开放研究项目等的资助。
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