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Cell Physiol Biochem:MSCA-1和CD146分离的骨膜细胞亚群的比较研究

2019-2-2 作者:MedSci   来源:MedSci原创 我要评论2
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骨膜组织是用于骨组织工程的多能干细胞的宝贵来源。为了详细表征这些细胞,我们生成了永生化的人颅骨骨膜细胞系,观察到MSCA-1和CD146表达增加,以及与亲代细胞相比更早和更强的矿化。此外,我们检测到MSCA-1的成骨潜能高于MSCA-1颅骨骨膜细胞(CPC)。在本研究中,研究了MSCA-1和CD146对骨膜细胞矿化的可能协同作用。

将MSCA-1 / CD146阳性和阴性CPC分离磁性(MACS)或通过流式细胞术(FACS)分选并进行成骨分化。通过定量实时PCR分析四个亚群中成骨标志物基因的表达。此外,通过多光谱成像流式细胞术(ImageStream,AMNIS)分析成骨标志物/抗原的共表达。通过茜素染色的定量评估矿化潜力。

结果显示,虽然与FACS方法相比,使用MACS分离后的总细胞产量更高,但是使用FACS分离,MSCA-1 +/-和CD146 +/-亚群的分离更有效。通过多光谱成像流式细胞术证实了四种不同细胞亚群的FACS分离的准确性。此外,我们在所有亚群中体外分化期间检测到MSCA-1和CD146的水平增加。然而,MSCA-1表达在MSCA-1 + / CD146 +和MSCA-1 + / CD146-亚群中显着更高,而CD146表达在这些组分中明显更低。在体外分化期间的不同时间点,与MSCA-1-CPC相比,在MSCA-1 +中检测到成骨标志物ALP和RUNX2的显着更高的基因表达水平。磷酸钙沉淀物的染色和定量显示MACS分离的MSCA-1 +和CD146-CPC的矿化潜力显着高于它们各自的对应物。 FACS分选的CPC在MSCA-1 +级分(d13)中显示早期矿化,而稍后(d28)仅CD146 + / MSCA-1级分与所有其他级分相比具有显着更低的磷酸钙浓度。

综上所述,该研究结果表明,从CPC中分离的MSCA-1 +细胞代表具有更高成骨潜力的亚群。相反,我们发现CD146 + CPC中的成骨潜能较低。总之,只有MSCA-1,而不是CD146,是从CPC中分离骨祖细胞的合适标记物。

原始出处:

Umrath F, Thomalla C, et al., Comparative Study of MSCA-1 and CD146 Isolated Periosteal Cell Subpopulations. Cell Physiol Biochem. 2018;51(3):1193-1206. doi: 10.1159/000495497. Epub 2018 Dec 12.



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yjs木玉

学习学习学习学习

(来自:梅斯医学APP)

2019-2-4 6:58:36 回复

txqjm

谢谢了,学习

(来自:梅斯医学APP)

2019-2-3 6:53:01 回复

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