J Int Med Res:β-catenin通过抑制铜绿假单胞菌引起的巨噬细胞自噬促进细胞内的细菌死亡
2018-01-27 MedSci MedSci原创
本研究旨在探究巨噬细胞RAW264.7中铜绿假单胞菌感染中β-连环蛋白介导的细菌清除作用。细胞活性和β-连环蛋白β1(CTNNB1)在铜绿假单胞菌感染后的RAW264.7细胞中与未感染细胞中的表达,通过细胞计数试剂盒法和β-连环蛋白的免疫印迹进行检测。使用β-连环蛋白慢病毒建立CTNNB1过表达的RAW264.7细胞。使用平板计数法测定细菌杀灭率,流式细胞仪测定吞噬功能和一氧化氮(no),使用格里
本研究旨在探究巨噬细胞RAW264.7中铜绿假单胞菌感染中β-连环蛋白介导的细菌清除作用。
细胞活性和β-连环蛋白β1(CTNNB1)在铜绿假单胞菌感染后的RAW264.7细胞中与未感染细胞中的表达,通过细胞计数试剂盒法和β-连环蛋白的免疫印迹进行检测。使用β-连环蛋白慢病毒建立CTNNB1过表达的RAW264.7细胞。使用平板计数法测定细菌杀灭率,流式细胞仪测定吞噬功能和一氧化氮(no),使用格里斯反应测定活性氧(ROS)。自噬是由微管相关蛋白1轻链3α-磷脂酰乙醇胺共轭(LC3-II)蛋白水平和LC3点状形成的,使用Western blot和免疫荧光染色进行分析。
结果显示,铜绿假单胞菌感染后,RAW264.7细胞中β-catenin的水平均降低,呈时间依赖性,方式多样。CTNNB1的过表达与铜绿假单胞菌消除增加有关,但对RAW264.7细胞吞噬功能、ROS和NO.CTNNB1过表达降低LC3-II水平和LC3点形成无影响,提示抑制自噬。雷帕霉素/饥饿诱导的自噬导致P. aeruginosa感染后细菌减少。
综上所述,该研究结果表明,β-catenin可能通过抑制铜绿假单胞菌诱导的巨噬细胞自噬而促进细菌的死亡。
原始出处:
Fu Q, Chen K, et al., β-catenin promotes intracellular bacterial killing via suppression of Pseudomonas aeruginosa-triggered macrophage autophagy. J Int Med Res. 2017 Apr;45(2):556-569. doi: 10.1177/0300060517692147. Epub 2017 Mar 21.
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