鉴定ABO血型时正反定型不一致怎么破
2018-04-11 沐同 医学之声
ABO血型定型包括正定型和反定型,用抗-A及抗-B试剂与被检细胞反应,检测红细胞表面是否存在A抗原和(或)B抗原,称之为正定型;用标准A细胞和B细胞与被检测血清反应,检测血清中是否存在相应的血型抗体,称之为反定型,正反定型一致方可确定结果,可出具报告。
20世纪初,卡尔·兰德斯坦纳(kar Landsteiner)发现了ABO血型,开启了免疫血清学大门,在不断的探索中,相继发现了MNS、P、Rh、Kell等血型系统,血型系统纷繁复杂,极易因血型不合而导致同种免疫反应,轻则输血无效,重则导致患者休克死亡,因此,准确地判断患者血型,是保障安全输血的前提,是最最最重要的关键环节。临床中主要鉴定ABO血型系统和Rh血型系统,而ABO血型定型也比较复杂,并不是正反定型结果一致便可报结果那么简单。
如何鉴定 ABO血型?
ABO血型定型包括正定型和反定型,用抗-A及抗-B试剂与被检细胞反应,检测红细胞表面是否存在A抗原和(或)B抗原,称之为正定型;用标准A细胞和B细胞与被检测血清反应,检测血清中是否存在相应的血型抗体,称之为反定型,正反定型一致方可确定结果,可出具报告。
以上为大多数情况,但ABO定型试验中会出现正反定型不一致,主要原因有技术和操作失误,还有受血者自身因素。
出现正反型不符时,不要盲目地判断或进行下一步的实验分析,应立即重复试验,看是否与之前结果一致,通知临床护士重新采集受血者的血标本,防止因采血失误导致的试验结果不确定性,咨询临床医生该患者用药史、输血史、既往史。询问患者(家属)是否知晓自己的血型。
待确定该标本为患者无误,采血良好,重复试验结果一致,方可进行下一步的分析。
受血者自身问题导致ABO血型试验正反定型不一致
(1) 异常的血浆蛋白
受检者血浆中异常的白蛋白、球蛋白比例、高浓度的纤维蛋白等问题,导致红细胞缗钱状形成,造成假凝集现象。如果镜下观察红细胞呈缗钱状排列,加等渗盐水均匀稀释,如果在试管中稀释,比例为1:3,若在玻片上 稀释为1:1,可以使缗钱状现象消失。
(2) 血清异常
脐带血中的华通胶或血清高M蛋白引起红细胞缗钱状,出现假凝集,处理同(1)。
(3) 红细胞致敏
受免疫球蛋白致敏的红细胞,在含高蛋白介质的试剂中可发生凝集。将红细胞做直接抗人球蛋白试验,若 结果呈阳性,表示红细胞已被抗体致敏。
(4) 嵌合体血型
这种血型者体内有两组红细胞群体,定型时可以出现“混合外观凝集 ”现象,常见于异卵双胎。
(5) 近期输血
受血者于试验前输入过其他ABO型的血液,使血液标本为不同血型的红细胞混合物,例如A型患者输入了O型洗涤红细胞,就有可能出“混合外观凝集”现象,但并不意味着该患者体内的血液从此是不同血型红细胞混合物,输入的异体血会代谢,会凋亡,患者自身会再生新的红细胞,输血治疗一段时间后,患者体内的血仍是自己的血,患者仍是原来的血型,没有改变。
(6) 疾病因素导致抗原减弱
患胃肠道腺癌时,由于丧失了转移酶而缺乏A和B抗原,血液病患者因缺乏H转移酶或酶受到抑制,致使ABH抗原发生“改变”或减弱,导致正反定型不一致,待病情缓解时又恢复过来。
(7) 获得性B
有肠道疾病的O型或A型病人,因肠道细菌影响而形成“类B”,表现为B型或AB型,待疾病恢复时,“类B”即可消失。
(8) 抗体减弱
低丙种球蛋白血症患者,会因机体免疫球蛋白水平全面下降,使反定型时与A细胞、B细胞不发生凝集,从而导致的正反定型不一致。
(9) 不规则抗体的存在
受检者血浆中,含有ABO血型以外的不规则抗体,与试剂A、B细胞上的相应抗原起反应,可以通过不规则抗体筛查试剂来检测受检者血浆中是否存在不规则抗体。
(10) 血型特异性物质过高
一些卵巢囊肿病例血液中血型物质浓度过高,可中和抗A及抗B试剂。可以将 红细胞用盐水洗涤数次,配制5%盐水红细胞悬液,用抗A、抗B、抗A1、抗A+B及抗H做定性试验。
(11) 红细胞多凝集现象
红细胞膜因遗传或获得性异常,如细菌酶作用几乎与所有人的血清发生凝集。
(12) 年龄因素
刚出生的新生儿、由母亲被动获得抗体的婴儿或老年人血清中的抗体水平均较弱,甚至检测不到抗体,但是红细胞表面抗原终生存在,所以可以根据年龄等综合判断,可忽略反定型结果。
(13) 药物因素
药物如右旋糖酐及静脉注射某些造影剂可引起红细胞聚集(注:不是凝集),类似凝集表现,属于假凝集,镜下观察判断,才能得到可靠的结论。
(14) 抗原位点减少或抗原性减弱
常见于A亚型,或将受检者红细胞与抗A/抗B血清做吸收放散试验,以及受检者唾液作A、B、H血型物质测定,后者只对80%分泌型的人有用。
技术操作失误造成ABO血型试验正反定型不一致
(1) 试验器材不清洁,产生假阳型结果
开启一天的工作前,要用消毒液对操作台、仪器表面进行擦拭消毒,保证操作环境的清洁,对所使用的试管、吸头等一次性消耗品,禁止重复利用,避免交叉污染,有条件的科室可以使用高压蒸汽灭菌的耗材。
(2) 错加标本或试剂,产生假阳性或假阴性结果
这属于人为差错,医生要本着认真的态度完成每一步操作,仔细确认,耐心核对信息,养成良好的工作习惯,既是对自己工作的复查,也是对患者负责。
(3) 试剂污染或失效,产生假阳性或假阴性结果
实验室每天的第一件事就是做室内质控,无论是手工操作还是自动化系统,室内质控会检测出当天试剂是否有效,是否能准确地出具报告,是否保证这一天工作的有效性,因此,每天的室内质控工作不可或缺。
(4) 细胞和血清之间比例不适当,产生假阳性或假阴性结果
血型鉴定的方法不同,红细胞悬液与血浆比例也不一样,试管法测ABO血型,红细胞悬液与血浆比例为1:1;而卡氏法则根据厂家说明书进行配比,不可擅自更改比例,否则抗原、抗体会因比例不当而出现前带或后带现象。
(5) 阳性反应产生溶血现象,判断失误导致假阴性结果
正反定型结果从两个方面判断:一是有无凝集:有凝集则为阳性,无凝集为阴性;二是有无溶血:有溶血为阳性,无溶血为阴性,溶血现象与血液凝集一样具有重要的临床意义。
(6) 漏加试剂,产生假阴性结果
为防止漏加试剂,滴加试剂后观察各个试管或加样孔内的液面,若在一个水平面上,说明各试剂无漏加,或观察颜色,若漏加红细胞悬液一眼便知。
(7) 结果记录或判断错误产生假阳性或假阴性结果
作为医生,粗心大意是个禁忌,当然,医生不是神,也有一不小心失误的时候,尤其夜班,精神状态不好的情况极易出错,但也只能尽力去保持较好的工作状态,从事医生这一行业,只能说,且行且认真。
(8) 离心过度或不足,产生假阳性或假阴性结果
离心过度会破坏红细胞,离心不足红细胞与血浆分离不彻底,都会影响试验结果,根据血液的量给予相应的合理转数和离心时间,尤其是急诊情况,离心的时间长短和质量甚至直接关系抢救时间和效果。
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