J Periodontal Res: 牙周病原体在损害上皮屏障功能中的作用
2018-07-22 MedSci MedSci原创
上皮 - 间质转化（EMT）是上皮细胞获得间充质样表型的过程，这可能通过革兰氏阴性细菌来诱导。已经有研究提出EMT在多种疾病中起着损害上皮屏障功能的作用。然而，之前尚未研究过EMT在牙周炎发病机制中的可能作用。因此，本研究的目的是研究革兰氏阴性，厌氧性牙周病原体是否可以在体外引发初级口腔角质形成细胞中的EMT。
上皮 - 间质转化（EMT）是上皮细胞获得间充质样表型的过程，这可能通过革兰氏阴性细菌来诱导。已经有研究提出EMT在多种疾病中起着损害上皮屏障功能的作用。然而，之前尚未研究过EMT在牙周炎发病机制中的可能作用。因此，本研究的目的是研究革兰氏阴性，厌氧性牙周病原体是否可以在体外引发初级口腔角质形成细胞中的EMT。
从Wistar Han大鼠的下唇粘膜获取原代口腔角化细胞。将细胞暴露于热灭活的Fusobacterium nucleatum和Porphyromonas gingivalis（100个细菌/上皮细胞）和20μg/ mL的大肠杆菌脂多糖8天。在检查的大多数时间点，与对照组相比，暴露于细菌并没有显着改变上皮细胞数量和活力。在暴露后第1，5和8天通过半定量RT-PCR测定EMT标记基因的表达。通过免疫荧光（E-钙粘蛋白和波形蛋白）和使用免疫细胞化学来评估EMT标志物的表达以确定Snail活化。通过测定跨上皮细胞的电阻，测定细菌对上皮单层一致性的影响。使用划痕和transwell迁移测定法研究迁移表型的诱导。
结果：暴露于牙周病原体的原发上皮细胞培养物与E-钙粘蛋白的转录上调（3倍），N-钙粘蛋白，波形蛋白，蜗牛，基质金属蛋白酶-2（3-5倍）的显着降低相关。细菌刺激（8天）也导致波形蛋白阳性细胞百分比增加（与对照相比用Porphyromonas gingivalis刺激后增加20％，用F. nucleatum刺激后增加30％）。此外，与对照组相比，牙周病原体显着增加了Snail的活化（60％），并且降低了电阻（P <.001）。实验组细胞的迁移能力显着增加，如迁移细胞的数量和划痕愈合率。
原代大鼠口腔角化细胞培养物长期暴露于牙周病原体产生类似EMT的特征，这可能与牙周炎期间上皮完整性丧失有关。
原始出处：
A. A. Abdulkareem， et al. Potential role of periodontal pathogens in compromising epithelial barrier function by inducing epithelial‐mesenchymal transition. Journal of Periodontal Research. 2018 August. doi： 10.1111/jre.12546
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