腺病毒感染与移植：常用诊断方法

腺病毒导致广泛的临床表现，主要包括呼吸道、胃肠道、泌尿生殖系统或全身感染。

诊断需要敏锐的临床意识到患者的临床表现，结合培养、分子检测、聚合酶链反应和组织取样进行诊断。

研究发现，血液、尿液或粪便筛查可预测儿童HSCT受者疾病的发生。尽管一些中心在移植前立即开始筛查，但大多数项目在化疗开始后开始。建议每周筛查一次血液和粪便，直至HSCT后至少100天或直至CD3 þ T细胞 > 300/mL。

考虑到支持成人筛查的数据较少，各中心方法的变异性较大。

AdV检测的诊断方式随着时间的推移而发展。历史上，培养和抗原检测常用于诊断腺病毒感染。

由于移植受者抗原检测的敏感性较差，PCR检测的诊断率提高，当代大多数诊断集中于PCR检测和病理学。可采集咽拭子、鼻洗液、结膜拭子或刮片、肛拭子、粪便、尿液和血液进行检测。样本类型应对应于临床上明显的感染部位（例如，用于GI疾病的粪便和用于泌尿生殖系统疾病的尿液）。

无论症状性疾病的部位如何，也经常对血液进行筛查，以评估播散性疾病并提高诊断率。

应注意的是，呼吸道病毒检测可能遗漏播散性疾病、病毒血症或上呼吸道感染以外的感染；因此，如果担心AdV感染，应检测多个部位。此外，考虑到AdV在各种组织中保持潜伏的能力，通常需要活检来记录感兴趣组织中的溶解性感染。

一旦确定临床疾病，通过相关样本的定量PCR进行系列监测，包括初始阳性的血液或其他来源，可告知治疗反应。干预（减少免疫抑制或西多福韦）1-2周后病毒载量未显著下降的患者可能需要替代方法进行管理。同样，病毒载量监测可在相关时告知增强免疫抑制的时间。

病毒亚型和血清分型可以通过基于免疫学或核酸序列的方法完成。这些技术目前主要用于流行病学研究和其他研究应用，临床上通常不需要用于患者的评价和管理。

1. 组织病理学

感染组织活检，除炎症的非特异性程度外，特征性的核内包涵体常提示诊断（图1）。在最常见于肾移植受者的腺病毒性肾炎患者中，最常观察到肾小管细胞增大伴两染性玻璃样核包涵体和肉芽肿形成（图1）。免疫组织化学或原位杂交技术作为形态学检查的辅助手段可能有助于明确识别组织切片中的AdV感染，提高检测的灵敏度，同时也可定位疾病并提供因果关系的证据。由于Adv肠炎可能与排斥反应相似，组织病理学可能特别有用，尤其是在小肠移植中。

图1：移植受者腺病毒肾炎的组织病理学。A，苏木精和伊红染色显示扩大的肾小管上皮细胞核内有玻璃样包涵体(×400)。B、肾小管上皮细胞腺病毒免疫组化染色。

2. 聚合酶链反应

血清PCR已成为儿童和成人HSCT受者中的重要筛查方法。任何考虑AdV疾病的时间，均应发送血液标本进行定量病毒载量测量。血清PCR对播散性AdV PCR检测敏感性高。还可对粪便、痰液和活检标本进行PCR。如果使用PCR监测治疗的临床反应或患者随时间的变化趋势，应使用相同的检测方法，并评估相同的隔室（全血与血浆），这是因为没有国际标准，并且检测方法之间的定量病毒学差异显著。

对呼吸道样本进行多重PCR检测，以检测上呼吸道和下呼吸道样本中的呼吸道病毒，通常具有极好的灵敏度和特异性。然而，每种检测方法具有不同的病原体特异性敏感性，尤其是对于AdV的不同种属或血清型。此外，一些检测试剂可能无法检测AdV的所有亚型。最后，如果呼吸道不是感染的主要部位，对呼吸道标本，特别是上呼吸道标本的检测可能产生阴性结果，但病毒有可能在其他地方正在进行复制。

还有许多多重检测方法可用于检测患者粪便中的AdV。已经开发了定量PCR测定法来监测粪便中病毒脱落和血液中复制的趋势。尽管有假阴性结果的报道，但这些分子方法比传统方法提高了灵敏度。定量病毒载量测量有助于感染的诊断，并作为与治疗临床应答相关的替代指标。病毒载量测量值增加与死亡可能性增加相关。

3. 抗病毒敏感性试验

很少有实验室能够进行抗病毒药敏试验，不推荐将其用于常规临床护理。没有得到普遍认可的标准方法。体外耐药性与AdV治疗的临床结局无明显相关性。

原文链接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34856601/

Adenovirus Infection and Transplantation