Sci Rep:载入地塞米松纳米球的RUNX2/SP7和ATF4的顺序转染增强了骨生成

2019-02-05 MedSci MedSci原创

基因转染的时间对干细胞分化有很大影响。顺序转染对细胞行为的调节至关重要。当分化开始后几天转染时,在分化晚期表达的基因可以调节细胞行为和功能。为了确定关键基因递送的最佳时间,我们依次转染人间充质干细胞(hMSCs)。该方法可以容易地控制干细胞的成骨。首先用RUNX2和SP7转染hMSCs,使用聚(乳酸-共-羟基乙酸)纳米颗粒诱导成骨,然后在5,7和14天后用ATF4转染。在用所有三种基因转染hMSC

基因转染的时间对干细胞分化有很大影响。顺序转染对细胞行为的调节至关重要。当分化开始后几天转染时,在分化晚期表达的基因可以调节细胞行为和功能。为了确定关键基因递送的最佳时间,我们依次转染人间充质干细胞(hMSCs)。该方法可以容易地控制干细胞的成骨。

首先用RUNX2和SP7转染hMSCs,使用聚(乳酸-共-羟基乙酸)纳米颗粒诱导成骨,然后在5,7和14天后用ATF4转染。在用所有三种基因转染hMSC之前,单独转染每种基因并监测其表达。通过RT-PCR,Western印迹和共聚焦显微镜确认这些基因的转染。pDNA进入hMSCs的细胞核,RUNX2和SP7蛋白被翻译并触发成骨。其次,当细胞处于成骨细胞前阶段时,ATF4基因被递送。为了诱导hMSCs的成骨,在RUNX2/SP7转染后14天ATF4基因递送的最佳时间。

结果显示,在2维和3维培养系统中,RUNX2/SP7后14天转染ATF4促进了hMSCs的成骨分化。

原始出处:

Hye Jin Kim, Ji Sun Park, et al., Sequential transfection of RUNX2/SP7 and ATF4 coated onto dexamethasone-loaded nanospheresenhances osteogenesis. Sci Rep. 2018; 8: 1447.