柳叶刀子刊：揭示亚洲首个血友病基因治疗药物临床研究成果

血友病作为一种遗传性出血疾病，主要分为两种类型，一种是血友病A型，即缺失凝血因子VIII，另一种是血友病B型，即缺失凝血因子IX。两者皆为X染色体隐形遗传，大部分患者为男性，女性一般不发病，有些携带致病基因的女性也会有轻微症状，常见的临床症状表现为关节和肌肉内出血。目前，传统治疗手段为凝血因子替换疗法，凝血因子来源为重组蛋白或从血浆中提取的凝血蛋白，可起到预防作用并治疗急性血友病。

但是血友病作为一种遗传疾病，必须通过及基因治疗才能根治。目前在研的基因疗法试图恢复患者内源性凝血基因IX（FIX）和凝血基因VIII（FVIII）的表达，如利用腺病毒（AVV）载体帮助患者恢复肝细胞表达缺失的FVIII，但该疗法可能激活患者体内对AVV载体的免疫反应，常使用糖皮质激素作为免疫抑制剂改善治疗效果。

近期，一项发表在《THE LANCET Haematology》的研究首次针对血友病B患者开展AVV肝导向基因治疗，验证新型AVV载体BBM-H901在治疗血友病B方面具有良好安全性和长期有效性。

研究招募了符合条件的10例的血友病B型患者，服用糖皮质激素一周后，在1小时内接受静脉注射5×1012vg/kg BBM-H901，并于2019年10月至2021年1月期间完成中位58周随访记录。

研究数据显示，注射BBM-H901载体后衍生的FIX基因活性（FIX:C）平均值为36.9IU/dL，招募的前三名患者的FIX:C平均值为33.6 IU/dL。BBM-H901 输注 1 周后，载体衍生的 FIX:C 迅速达到平均值 57·1 IU/dL，输注5周后，FIX:C近峰值，平均值64·1 IU/dL。图B显示，在注射后1天，就可以检测到FIX表达，图C显示，在注射后的24小时内，血浆中载体迅速脱落，在随访中发现28天后血浆和唾液中检测不到载体DNA，56天后精液中检测不到载体DNA。图D-F显示BBM-H901载体为患者提供显著临床获益，注射前后，患者的中位靶向关节数由1.5个降至0个，中位年化出血率由12次降至0次，中位FIX药物输注次数由53.5次降至0次。

在整个研究过程中，只在两名患者中出现血清转氨酶ALT和AST含量升高现象。研究进一步显示，ALT和AST变化主要发生在8-10周（已停用糖皮质激素）并与FIX活性呈负相关，但在ALT和AST升高的患者中，用IFN-γELISpot法检测AAV-衣壳特异性T细胞结果均为阴性，可能是AVV的特异性 T 细胞较少或者ELISpot 检测的灵敏度较低导致。

研究还讨论了预先服用糖皮质激素在免疫抑制方面的作用。服用糖皮质激素后，对T细胞亚群进行单细胞RNA测序，比较了FIX:C活性满意组和活性较差组患者细胞毒性 T 细胞的免疫学状态，发现细胞毒性T 细胞可能是导致活性较差的主要因素，糖皮质激素可以抑制免疫反应，促进Treg活化，抑制抗原呈递APC 的能力，降低CD16 +单核细胞和T 细胞亚群细胞间通讯能力。

在整个1期研究中，评估了 BBM-H901（一种基于 AAV 的基因治疗载体）在血友病B类患者中的耐受性和安全性。实验中创新之处有二，首先是采用了BBM-H901新型载体，该载体融合了靶向肝脏的AAV衣壳和创新性表达盒，使药物可以高效感染肝细胞；其次，研究在BBM-H901注射前 7 天让患者预先口服糖皮质激素，除了起到免疫抑制作用，还有助于尽早发现患者由基因治疗引发的血清转氨酶ALT和AST表达量升高。

虽然这项研究提供了 BBM-H901 的安全耐受性和活性的数据，但研究的时间相对较短，长期临床益处在未来几年内仍有待监测。即便如此，BBM-H901基因治疗治愈血友病作为亚洲首个基因治疗药物临床研究成果也为其他全身递送的罕见病基因治疗药物研发提供了重要参考。

参考文献：

【1】Xue F, Li H, Wu X.el Safety and activity of an engineered, liver-tropic adeno-associated virus vector expressing a hyperactive Padua factor IX administered with prophylactic glucocorticoids in patients with haemophilia B: a single-centre, single-arm, phase 1, pilot trial. Lancet Haematol. 2022 May 19:S2352-3026(22)00113-2. doi: 10.1016/S2352-3026(22)00113-2. Epub ahead of print. PMID: 35598604.