Clinica Chimica Acta：超高效液相色谱-串联质谱法测定外周血单核细胞钙调磷酸酶活性
2019-09-22 gladiator MedSci原创
在移植后常规使用钙调神经磷酸酶抑制剂-他克莫司(TAC)的治疗性药物监测。目前，calcineurin活性的测定已被认为是一种有前景的临床工具，以评估疗效和优化药物剂量。本研究的主要目的是建立一种超高效液相色谱-串联质谱法测定外周血单核细胞磷酸酶钙调磷酸酶活性(CNA)的方法，并按照FDA和EMA指南进行验证。
在移植后常规使用钙调神经磷酸酶抑制剂-他克莫司(TAC)的治疗性药物监测。目前，calcineurin活性的测定已被认为是一种有前景的临床工具，以评估疗效和优化药物剂量。本研究的主要目的是建立一种超高效液相色谱-串联质谱法测定外周血单核细胞磷酸酶钙调磷酸酶活性(CNA)的方法，并按照FDA和EMA指南进行验证。
该方法基于监测磷酸肽底物的Ca2+依赖性脱磷酸化。在5名健康志愿者和5名肾移植患者中，在药物摄入前接受每日两次TAC制剂的CNA评估。此外,我们研究了药效的TAC TAC在不同药物剂量和血药浓度间隔(0、1、3、6和12 h)。
我们的研究结果显示：线性范围在0.04 - -2.00 μM量化的下限为0.04 μM。变异系数<4.3%，绝对相对偏差< 10.3%。肽复苏为91.6 ± 4.0%。基质效应研究显示离子抑制，未见结转和干扰。健康组与接受taco治疗组CNA无显著差异。此外，CAN具有最大抑制药物摄入后1 h TAC达到血药浓度最高。
研究表明，该方法改进了PBMCs的萃取相，与其他方法相比，具有测定速度快的优点，使其更接近于在实验室的日常应用。
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