Exp Mol Pathol:LncRNA KCNQ1OT1通过海绵miRNA-214促进BMP2表达以调节成骨分化

2019-02-01 MedSci MedSci原创

骨髓间充质干细胞(BMSCs)的成骨分化对于骨形成具有重要意义,其不平衡会导致骨质疏松症和其他病理性骨缺损。越来越多的证据表明,长链非编码RNA(lncRNA)和miRNA在成骨分化的调节中起着至关重要的作用。LncRNA KCNQ1OT1通常被认为是印迹lncRNA并且与肿瘤进展相关,而其在成骨分化中的功能仍不清楚。进行qRT-PCR以检测KCNQ1OT1,miR-214和成骨相关基因BMP2,

骨髓间充质干细胞(BMSCs)的成骨分化对于骨形成具有重要意义,其不平衡会导致骨质疏松症和其他病理性骨缺损。越来越多的证据表明,长链非编码RNA(lncRNA)和miRNA在成骨分化的调节中起着至关重要的作用。LncRNA KCNQ1OT1通常被认为是印迹lncRNA并且与肿瘤进展相关,而其在成骨分化中的功能仍不清楚。

进行qRT-PCR以检测KCNQ1OT1,miR-214和成骨相关基因BMP2,Runx2,OPN和OCN的表达。进行蛋白质印迹以检测成骨相关标志物。通过碱性磷酸酶(ALP)活性和茜素红S积累检测证明成骨细胞表型。生物信息学和荧光素酶测定用于预测和验证KCNQ1OT1和miR-214以及BMP2和miR-214之间的相互作用。

结果显示,KCNQ1OT1在成骨诱导过程中显著上调,而miR-214则相反下调。KCNQ1OT1的敲低抑制了成骨分化并下调了BMP2和成骨相关基因。还证实KCNQ1OT1直接与miR-214相互作用。同时,miR-214可以与BMP2的3'UTR结合,从而抑制其表达。此外,miR-214抑制剂的共转染可以挽救KMPQ1OT1敲低诱导的BMP2和成骨相关基因的下调和成骨分化抑制。此外,miR-214抑制剂显著逆转shKCNQ1OT1诱导的p-Smad1/5/8、Runx2和Osterix蛋白水平的下降。

综上所述,该研究结果表明,KCNQ1OT1通过作为ceRNA通过海绵miR-214调节BMP2表达,正调节BMSCs的成骨分化。

原始出处:

Wang CG, Liao Z, et al., LncRNA KCNQ1OT1 promoted BMP2 expression to regulate osteogenic differentiation by sponging miRNA-214. Exp Mol Pathol. 2019 Jan 28. pii: S0014-4800(18)30474-X. doi: 10.1016/j.yexmp.2019.01.012.