Cell Physiol Biochem：MSCA-1和CD146分离的骨膜细胞亚群的比较研究
2019-02-02 MedSci MedSci原创
骨膜组织是用于骨组织工程的多能干细胞的宝贵来源。为了详细表征这些细胞，我们生成了永生化的人颅骨骨膜细胞系，观察到MSCA-1和CD146表达增加，以及与亲代细胞相比更早和更强的矿化。此外，我们检测到MSCA-1的成骨潜能高于MSCA-1颅骨骨膜细胞（CPC）。在本研究中，研究了MSCA-1和CD146对骨膜细胞矿化的可能协同作用。将MSCA-1 / CD146阳性和阴性CPC分离磁性（MACS）或
骨膜组织是用于骨组织工程的多能干细胞的宝贵来源。为了详细表征这些细胞，我们生成了永生化的人颅骨骨膜细胞系，观察到MSCA-1和CD146表达增加，以及与亲代细胞相比更早和更强的矿化。此外，我们检测到MSCA-1的成骨潜能高于MSCA-1颅骨骨膜细胞（CPC）。在本研究中，研究了MSCA-1和CD146对骨膜细胞矿化的可能协同作用。
将MSCA-1 / CD146阳性和阴性CPC分离磁性（MACS）或通过流式细胞术（FACS）分选并进行成骨分化。通过定量实时PCR分析四个亚群中成骨标志物基因的表达。此外，通过多光谱成像流式细胞术（ImageStream，AMNIS）分析成骨标志物/抗原的共表达。通过茜素染色的定量评估矿化潜力。
结果显示，虽然与FACS方法相比，使用MACS分离后的总细胞产量更高，但是使用FACS分离，MSCA-1 +/-和CD146 +/-亚群的分离更有效。通过多光谱成像流式细胞术证实了四种不同细胞亚群的FACS分离的准确性。此外，我们在所有亚群中体外分化期间检测到MSCA-1和CD146的水平增加。然而，MSCA-1表达在MSCA-1 + / CD146 +和MSCA-1 + / CD146-亚群中显着更高，而CD146表达在这些组分中明显更低。在体外分化期间的不同时间点，与MSCA-1-CPC相比，在MSCA-1 +中检测到成骨标志物ALP和RUNX2的显着更高的基因表达水平。磷酸钙沉淀物的染色和定量显示MACS分离的MSCA-1 +和CD146-CPC的矿化潜力显着高于它们各自的对应物。 FACS分选的CPC在MSCA-1 +级分（d13）中显示早期矿化，而稍后（d28）仅CD146 + / MSCA-1级分与所有其他级分相比具有显着更低的磷酸钙浓度。
综上所述，该研究结果表明，从CPC中分离的MSCA-1 +细胞代表具有更高成骨潜力的亚群。相反，我们发现CD146 + CPC中的成骨潜能较低。总之，只有MSCA-1，而不是CD146，是从CPC中分离骨祖细胞的合适标记物。
原始出处：
Umrath F, Thomalla C, et al., Comparative Study of MSCA-1 and CD146 Isolated Periosteal Cell Subpopulations. Cell Physiol Biochem. 2018;51(3):1193-1206. doi: 10.1159/000495497. Epub 2018 Dec 12.
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