Biochem Biophys Res Commun：从小鼠干细胞产生表达视紫红质和S-和M-视锥视蛋白的三维视网膜类器官！
2017-12-24 cuiguizhong MedSci原创
日本兵库县神户市神户市发育生物学研究中心视网膜再生实验室的Ueda K 近日在Biochem Biophys Res Commun发表了他们团队的重要工作，他们改进快速聚集（SFEBq）过程，从小鼠干细胞进行定向分化，得到了表达更多杆状感光体和S-视锥和M-视锥视蛋白的视网膜类器官。
日本兵库县神户市神户市发育生物学研究中心视网膜再生实验室的Ueda K 近日在Biochem Biophys Res Commun发表了他们团队的重要工作，他们改进快速聚集（SFEBq）过程，从小鼠干细胞进行定向分化，得到了表达更多杆状感光体和S-视锥和M-视锥视蛋白的视网膜类器官。
在特定的培养基条件下，三维视网膜类器官可以从胚胎干细胞或诱导多能干细胞（ES / iPS细胞）进行定向分化得到。在类胚体样聚集体的无血清悬浮培养过程中，他们改进快速聚集（SFEBq）过程，获得表达更多杆状感光体和S-视锥和M-视锥视蛋白的视网膜类器官。
根据光感受器发育过程，将小鼠Nrl-eGFP iPS细胞培养在各种培养基中，以分化得到视网膜类器官。为了促进杆状感光器的发育，将类器官在含有9-顺式视黄酸（9cRA）的培养基中进行培养。为了获得具有M-视蛋白表达的视网膜类器官，他们在含有T3、BMP4和DAPT的1％胎牛血清（FBS）的培养基中进行培养。通过切片免疫组织化学的方法来检测光感受器标记物的表达。
分析结果发现，在含有9-顺式视黄酸（9cRA）的培养基中培养的三维（3D）视网膜类器官中，早期表达视紫红质并抑制S锥视蛋白的表达。在含1％FBS的培养基中，三维视网膜类器官可以维持达到DD 35阶段。三维视网膜类器官表达视紫红质、S-和M-视蛋白，但大多数锥形感光细胞表达S-或M-视蛋白。
因此，他们认为，通过改进快速聚集（SFEBq）过程中的培养条件，他们获得了以视杆细胞为主的三维视网膜类器官，并且在三维视网膜类器官中表达S-视蛋白和M-视蛋白。
原文出处：
Ueda， K.， et al.， Generation of three-dimensional retinal organoids expressing rhodopsin and S- and M-cone opsins from mouse stem cells. Biochem Biophys Res Commun， 2017.
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