Eur Rev Med Pharmacol Sci:研究发现miR-374b可以通过降解PTEN促进MSCs的成骨分化

2018-06-22 MedSci MedSci原创

本研究旨在探究miR-374b是否通过介导PTEN促进MSCs分化为成骨细胞,从而促进骨折愈合。 提取小鼠间充质干细胞进行实验。流式细胞术确定MSCs表面抗原的表达以鉴定其纯度。使用茜素红染色来检测MSCs是否可以分化为成骨细胞。QRT-PCR检测骨折小鼠模型骨髓MSCs中成骨标志物基因的表达以及miR-374b和PTEN的表达。ALP活性检测试剂盒用于检测细胞中的ALP活性。 Western印迹

本研究旨在探究miR-374b是否通过介导PTEN促进MSCs分化为成骨细胞,从而促进骨折愈合。

提取小鼠间充质干细胞进行实验。流式细胞术确定MSCs表面抗原的表达以鉴定其纯度。使用茜素红染色来检测MSCs是否可以分化为成骨细胞。QRT-PCR检测骨折小鼠模型骨髓MSCs中成骨标志物基因的表达以及miR-374b和PTEN的表达。ALP活性检测试剂盒用于检测细胞中的ALP活性。 Western印迹评估细胞中成骨蛋白的变化。使用生物信息学方法来预测miR-374与靶基因之间的结合位点。使用萤光素酶报告基因测定法来确认miR-374是否可以与靶基因结合。

结果显示,在正常培养下,第4天MSCs长成长梭形。在成骨诱导培养基中诱导7天后,出现钙化结节。MSCs表面抗原标志物检测结果显示CD90为99.12%,CD45为0.23%。茜素红染色显示MSCs具有分化成成骨的能力。MiR-374b和PTEN的表达水平在小鼠骨折早期明显增加,但在后期没有观察到明显差异。过表达miR-374b后,细胞ALP活性、成骨相关基因和成骨相关蛋白的表达显著增加,而敲除miR-374b后,观察到相反的结果。萤光素酶报告测定的结果显示miR-374b可结合PTEN。如上所述,miR-374b的过表达可显著增加成骨相关基因和蛋白质的表达,而PTEN和miR-374b的过度表达可部分逆转结果。

综上所述,该研究结果表明,miR-374b可以通过降解PTEN促进MSCs的成骨分化,从而促进骨折愈合。

原始出处:


Ge JB, Lin JT, et al., MiR-374b promotes osteogenic differentiation of MSCs by degrading PTEN and promoting fracture healing
. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2018 Jun;22(11):3303-3310. doi: 10.26355/eurrev_201806_15149.