1 例多次输血者弱抗体的产生过程及其对输血效果的影响

2020-07-30 黄娴 李彤彤 种靖慧 临床检验杂志

为保证输血安全和有效,输血前需要筛查患者 的不规则抗体,以使患者输注配合的血液。漏检低 效价的弱抗体会导致血液输注无效,甚至导致溶血 性输血反应[1]。本实验室遇到1 例因多次输血致产 生弱的不规则抗

为保证输血安全和有效,输血前需要筛查患者 的不规则抗体,以使患者输注配合的血液。漏检低 效价的弱抗体会导致血液输注无效,甚至导致溶血 性输血反应[1]。本实验室遇到1 例因多次输血致产 生弱的不规则抗体的病例,报告如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象及资料 患儿,女, 9 岁,既往无输血 史,怀疑药物导致贫血,血型鉴定为 A 型,RhD 阳 性。2017 年 5 月 11 日入院,15 d 内输血 12 次,输 血效果不佳。本实验室全程受医院委托进行交叉配 血,第 12 次输血前检出抗 E 抗体,回顾性检测该抗 体的产生过程,分析其对输血效果的影响。

1.2 主要试剂和仪器 筛选细胞和谱细胞购自荷 兰 Sanquin 公司,抗人球蛋白卡购自美国 Bio-Rad 公 司,凝聚胺、聚乙二醇( polyethylene glycol,PEG) 试 剂购自长春博德公司,酸放散试剂购自珠海贝索生 物技术公司,木瓜酶粉剂、抗 E、抗 e、抗 C、抗 c 均购 自上海血液生物医药公司,所有试剂均在有效期内 使用。KA-2200 型离心机( 日本久保田公司) ,试剂 卡孵育箱和离心机、数字显示式恒温水浴箱、可调移 液器( 美国 Bio-Rad 公司) 。

1.3 不规则抗体鉴定 盐水法、凝聚胺法、微柱凝 集法( microcolumn gel test,MGT) 3 种常用血型血清 学试验方法和酸放散试验均按试剂说明书操作,直 接抗人球蛋白试验采用 MGT。

1.4 PEG-MGT 在试管中加入 100 μL 患者血浆、 200 μL PEG 试剂和 50 μL 2%~5%红细胞,37 ℃温 育 15 min 后用盐水洗涤 4 次,配制成合适浓度的悬 液。由于本试验中试管抗人球蛋白法检测 PEG 处 理后的细胞凝集强度很弱,为便于判读,将处理后的 细胞配成合适浓度的悬液,加入 IgG 单抗的凝胶卡 并离心,记录凝集强度。

1.5 酶-MGT 采用 2 步酶法,将筛选细胞和谱细 胞用盐水洗涤 3 次后配成 2% ~3%浓度,加入等量 的木瓜蛋白酶,37 ℃温育 10 min 后用盐水洗涤 3 次。由于试管抗人球法检测木瓜酶处理后的红细胞 与患者血浆凝集强度太弱无法判读,将酶处理红细 胞配制成 1%浓度的低离子悬液,加入抗 IgG+C3d 的凝胶卡,再加入患者血浆,37 ℃温育后离心,记录 凝集强度。

2 结果

2.1 直接抗人球蛋白试验 见表1。第1 次输血前 患者红细胞直接抗人球蛋白试验呈 2+,第 2 次呈 1+,第 3 次和第 4 次呈 w+,第 5 次至第12 次输血前 样本直接抗人球蛋白试验全为阴性。

2.2 抗体筛查 第 1 至 4 次输血前抗筛盐水法、凝 聚胺法、MGT 均为阴性,由于此时患者直接抗人球 蛋白试验阳性,为避免自身抗体干扰未进行 PEG-MGT和酶-MGT 试验。第 5 至 8 次输血前抗筛 盐水法、凝聚胺法、MGT、PEG-MGT 和酶-MGT 均为 阴性。第 9 次输血前酶-MGT 检出不规则抗体,第 12 次输血前酶-MGT 与 PEG-MGT 均检出不规则抗 体,谱细胞格局符合抗 E 抗体( 篇幅所限未列出谱 细胞格局表) ,患者 Rh 分型为 CCDee。历次抗筛结 果见表 1。另外,第 1 次和第 12 次输血前抗筛盐水 法室温下为阴性, 2 次的血清 4 ℃温育 10 min 后抗筛细胞和自身对照均凝集且强度均为 3+,均含有自 身冷抗体。


2.3 抗体性质 第12 次输血前的患者血清经2-Me 处理 30 min 后,酶-MGT 法检测抗筛变为阴性,证 实抗 E 抗体为 IgM 性质。

2.4 酸放散试验 第 1 次和第 12 次输血前的患者 样本分别进行酸放散试验,第 1 次的红细胞放散液 未检出特异性抗体,第 12 次的红细胞放散液采用 酶-MGT 法检出抗 E 抗体。

2.5 抗体对输血有效性的影响 血红蛋白量随天 数变化的曲线见图 1。结合图 1 和表 1 结果发现, 从第 13 天开始检测到抗 E 抗体,第 6 天、12 天、15 天输注不含 E 抗原的血液,均使血红蛋白提高。而 第 5 天、 9 天、10 天、14 天仅输注含有 E 抗原的血 液,均未能提高血红蛋白水平。

3 讨论

盐水法、凝聚胺法、MGT、酶法是常见的不规则抗体筛查方法,凝聚胺法、MGT、酶法对于检测 Rh 系统的常见 IgG 类抗体,差异无统计学意义[2]; 而 IgM 类抗体通常采用盐水法筛查,部分 IgM 抗体可 由 MGT 检测到[3]。本例弱 IgM 抗 E 抗体伴随自身 冷抗体,室温盐水法阴性,4 ℃盐水法由于冷抗体无 法鉴定特异性抗体,PEG-试管抗人球蛋白法( PEGIAT) 和酶-试管抗人球蛋白法( 酶-IAT) 亦因凝集 强度太弱而不易判读。采用酶-MGT,患者直抗阴 性,37 ℃温育排除冷抗体的干扰,使用含有多种抗 人球蛋白的凝胶卡检测血浆,具有更高的灵敏度且 结果直观,为鉴定弱 IgM 型不规则抗体提供了可选 方法。为避免补体 C3 结合自身抗体的干扰,PEGMGT 使用 IgG 单抗卡,该方法在本例弱抗体检测过 程中的灵敏度不及酶-MGT。本研究中患者输注不 含相应抗原的血液,血红蛋白水平得到提升,而含有 相应抗原的血液不能提高血红蛋白水平,证明该抗 体具有临床意义。

受血者产生不规则抗体与输血次数密切相关, 当输血次数大于 6 次,不规则抗体的发生频率可达 89.7% [4] 。在我国最常见的不规则抗体是抗 E 抗 体[5],本研究中患者 15 d 输血 12 次,出现输注无 效,经鉴定产生抗 E 抗体。对于多次受血者可检测 E 抗原,输注 E 同型或相容的血液,降低多次受血者 产生不规则抗体的概率,减少其输注无效和发生输 血反应的频率,从而提升输血的安全性和有效性。

参考文献略。

原始出处:

黄娴,李彤彤,种靖慧,解金辉等,1 例多次输血者弱抗体的产生过程及其对输血效果的影响[J],临床检验杂志,2020,38(5)。



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