Prostate Cancer P D:通过CRISPR失活CDKN2A位点和端粒酶的表达实现人原代前列腺上皮细胞永生化
2020-09-16 AlexYang MedSci原创
在没有DNA肿瘤病毒蛋白或p16INK4A敲除的情况下,仅用hTERT表达的原代前列腺上皮细胞(PrEC)永生化效率非常低。
在没有DNA肿瘤病毒蛋白或p16INK4A敲除的情况下,仅用hTERT表达的原代前列腺上皮细胞(PrEC)永生化效率非常低。
在近期发表在Prostate Cancer Prostatic Dis期刊的一项研究中,来自美国Fels癌症研究和分子生物学研究所的科学家们建立了永生的正常前列腺上皮细胞系模型。该模型利用CRISPR技术来使伴随hTERT转基因异位表达的CDKN2A位点失活。
结果显示,研究人员通过该方法获得了具有正常细胞基本特征的永生细胞克隆,这些特征包括二倍体基因组、接近正常的核型、正常的p53和pRB细胞反应、形成非侵袭性球状体的能力和非转化表型。根据标记物的表达,这些克隆来源于基底细胞。
人类前列腺上皮细胞(PrEC)的永生化及验证
该研究表明,使用这种方法可以使PrEC的独立克隆永生化,并使其保持正常的特性,稳定且不转化。因此,该方法可用于正常原代前列腺细胞的永生化。该技术也可用于建立不同肿瘤级别的前列腺肿瘤组织和/或不同种族的患者的细胞系,以生成细胞系模型,促进疾病差异的分子基础研究。
原始出处:
Zhao, Z., Fowle, H., Valentine, H. et al. Immortalization of human primary prostate epithelial cells via CRISPR inactivation of the CDKN2A locus and expression of telomerase. Prostate Cancer P D. Sep 2020.
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