Clinica Chimica Acta:原发性开角型青光眼患者的眼泪中可以得到什么信息?
2019-10-17 gladiator MedSci原创
眼泪是对眼科疾病有潜在的诊断价值一种生物液体。
眼泪是对眼科疾病有潜在的诊断价值一种生物液体。本研究的目的是利用透射电镜(TEM)和分子生物学方法,比较原发性开角型青光眼(POAG)患者和健康人(HPs)的泪液上清液和微滴。
采用超滤法和超离心法制备泪液上清和微滴,采用阴性染色法和免疫金标记TEM法进行检测。 使用MiSeq(Illumina,美国)基因组测序仪和Reagent Kit
v3(600?cycles,Illumina,美国)对沉淀的DNA进行分离,定量和测序。 从沉淀中分离和定量MicroRNA;使用TaqMan
MicroRNA检测miR-146b、miR-16和miR-126(应用生物系统,美国)。
对POAG患者和HPs患者的泪液上清液进行透射电镜观察发现了相同的成分:包括球形或杯状囊泡、“非囊泡”、细胞碎片和高分子聚集物。POAG患者和HPs患者含有小的细胞外囊泡(sEVs),无标记囊泡和“无囊泡”;来自病人的微粒中含有带有“胶囊”的sEVs。POAG患者泪液微粒与HPs泪液微粒相比,基因组ds-DNA、SINE-repeats浓度升高,miR-146b、miR-16、miR-126表达不同,细菌DNA组不同。
所获得的数据表明,HPs和POAG患者的眼泪可作为TEM研究的对象,并可作为含sEV制剂(小丸)的来源,进而可用于分离和研究基因组ds- DNA和RNA。 我们的数据为将眼泪用于诊断应用提供了基础。
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