Eur Rev Med Pharmacol Sci:长链非编码RNA H19通过Wnt /β-catenin信号通路促进大鼠外胚间充质干细胞的成骨分化

2018-12-29 MedSci MedSci原创

本研究旨在探究长非编码RNA(lncRNA)H19促进大鼠外胚间充质干细胞(EMSCs)的成骨分化的分子机制。通过流式细胞术从大鼠胎儿面部过程中分离EMSC。通过荧光免疫测定检测成骨标志物CD29,CD90,CD44,CD57,巢蛋白和sox10。瞬时干扰H19构建后,即稳定表达H19 的EMSCs细胞系,使用实时聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测β-catenin和Wnt

本研究旨在探究长非编码RNA(lncRNA)H19促进大鼠外胚间充质干细胞(EMSCs)的成骨分化的分子机制。

通过流式细胞术从大鼠胎儿面部过程中分离EMSC。通过荧光免疫测定检测成骨标志物CD29,CD90,CD44,CD57,巢蛋白和sox10。瞬时干扰H19构建后,即稳定表达H19 的EMSCs细胞系,使用实时聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测β-catenin和Wnt通路靶基因,并诱导EMSCs细胞成骨分化。使用Wnt /β-catenin信号通路抑制剂Wnt-C59处理过表达H19的EMSCs,通过RT-PCR和Western blot检测β-catenin和成骨标志物的表达。此外,通过转染miR-22和miR-141模拟物和荧光素酶报告基因测定来探索H19调节Wnt /β-连环蛋白信号传导途径的机制。

结果显示,研究成功分离并鉴定了EMSCs,成骨标志物CD29,CD90,CD44,CD57,巢蛋白和sox10明显过表达。成骨诱导的溶液明显增加EMS19中H19和成骨标志物ALP,Runx2,BMP和OCN的表达(p <0.05)。干扰H19明显抑制Wnt /β-catenin信号通路的成骨标志物,β-连环蛋白和靶基因的表达(p <0.05),而H19的上调则显著促进EMSCs中这些标志物和基因的表达(p <0.05)。Wnt-C59抑制剂治疗在具有H19过表达的EMSC中抑制Wnt /β-连环蛋白信号传导通路和成骨分化(p <0.05)。此外,H19可以阻断miR-22和miR-141对β-catenin的抑制作用,并在转染EMSC中的miR-22模拟物和miR-141模拟物后激活Wnt /β-catenin信号通路(p <0.05)。

综上所述,该研究结果表明,LncRNA H19通过激活Wnt /β-catenin信号促进大鼠EMSCs的成骨分化,为EMSCs在牙体组织工程再生修复中的应用提供理论依据。

原始出处:

Gong YY, Peng MY, et al., Long non-coding RNA H19 promotes the osteogenic differentiation of rat ectomesenchymal stem cells via Wnt/β-catenin signaling pathway. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2018 Dec;22(24):8805-8813. doi: 10.26355/eurrev_201812_16648.

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