国家自然科学基金摘要范例（2）

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30772829 针刺镇痛和针刺免疫调节作用的共同机制研究
申请书摘要我们的上一个国家自然科学基金课题《针刺镇痛和针刺免疫调节作用的共同中枢机制研究》结果表明，针刺镇痛机制与免疫调节机制之间在中枢存在着密切的联系，下丘脑神经肽CRH、TRH及SS是其作用的重要调节点之一。 外源性CRH、TRH、SS激活了内源性镇痛系统，通过其受体发挥其镇痛及免疫调整功能。但对CRH、TRH、SS镇痛和免疫调节的确切作用途径及其他递 质的作用尚需要进一步研究。本研究拟在前期工作的基础上，以具有临床意义的炎症痛模型大鼠为研究对象，分别采用行为学和分子生物学的方法，从整体、细胞信 号转导、分子形态角度研究针刺夹脊穴对疼痛和免疫调节时，内源性CRH、TRH及SS等在针刺镇痛及免疫调整功能中的作用途径及其与内阿片肽、经典神经递 质之间的作用关系。以揭示下丘脑神经肽在针刺的镇痛免疫调节中的作用及机制，阐明针刺镇痛的整体机理，探讨针灸作用的生物学基础，为中医现代化与国际化奠 定基础。

30772835 偏头痛循经取穴针刺效应的脑内神经信息响应特征研究
申请书摘要循经取穴是针灸临床最基本的选穴原则，从古至今数千年的针灸临床实践证实，循经取穴是取得良好疗效的基本保证。目前迫切需要回答的是循经取穴的 科学依据是什么？基于此，本课题将在中医针灸理论指导下，密切围绕"循经取穴针刺效应在脑内的神经信息响应有征可寻"的研究假说，整合神经生理学、生物物 理学、计算机科学、数学、针灸学等多学科方法技术，以针灸临床证实确有疗效的偏头痛作为切入点，将传统脑电检测和功能磁共振技术相结合，提取循经取穴针刺 干预后的脑内时空动态神经信息，并结合我们自主建立、成熟公认的最新脑电算法，挖掘神经信息响应特征，建立循经取穴针刺效应的脑内神经信息响应模型，为循 经取穴的临床运用提供更为充分的科学依据，推动针灸学基本理论与现代科学技术的有机结合，促进针灸学的传承与发展。

30772840 针刺治疗急性脑出血神经重塑机制的研究
申请书摘要脑出血的防治是当今医学领域的一项重大课题，目前寻找一种切实可行的促进脑出血后神经功能修复与重塑的临床方法已成为医学领域的研究难点。本课 题研究的目的，主要针对脑出血急性期的缺血缺氧性损伤机制，通过针刺头部腧穴，明确针刺干预的有效性；探讨神经干细胞在分化产生神经系统各类细胞的过程中 所需要的神经生长因子、神经营养因子的协同作用；研究脑出血后大鼠脑内神经干细胞的定性和定量指标巢蛋白表达，阐明针刺与其相关性，从针刺调控内源性神经 营养因子表达，促进神经干细胞增殖分化的角度，揭示针刺治疗脑出血后神经系统损伤修复再生的机理。我们通过复制急性脑出血大鼠模型，采用"百会"透"曲 鬓"针刺方法，应用Western免疫印迹、原位杂交、免疫组化、光镜及透射电镜等检测方法分别观察针刺干预对急性脑出血大鼠脑内病理形态学、神经生长 （营养）因子表达、神经干细胞增殖分化的影响，为研究神经组织的结构和功能重塑开创新的研究手段。

30471664 “缺血后处理”减轻脑缺血再灌注损伤的机制研究
申请书摘要 脑缺血预处理（ischemic preconditioning）研究有一定进展，但其临床可操作性差。我们的预实验结果显示，在脑缺血再灌注时行短暂缺血处理（缺血后处理,ischemic postconditioning）可显著减轻脑缺血再灌注损伤。本项目拟在我们预实验的基础上，应用大鼠全脑和局灶性脑缺血模型，获取"缺血后处理"减轻脑缺血再灌注损伤作用的最佳处理方案；利用基因芯片研究脑缺血后处理引起的

负责人 王单松 项目批准号 30772521 学科代码 C03031906
项目名称 携带IL-24基因的双靶向增殖腺病毒治疗胰腺癌实验研究
申请书摘要胰腺癌是一种预后极差的恶性肿瘤，传统的治疗手段包括手术、化疗和放疗等，疗效不佳。基因治疗被寄予厚望。理想的癌症基因治疗应当是靶向性杀死 或者抑制肿瘤细胞，同时能激活机体的全身免疫防御反应。我们在构建了能够选择性地在p53突变的胰腺癌细胞中增殖并杀伤肿瘤而不会在正常细胞中增殖的 ZD55腺病毒的基础上，进一步采用胰腺癌特异性的MUC-1启动子控制ZD55病毒E1A的表达，以进一步增强其对胰腺癌细胞的靶向性和安全性。同时我 们在病毒基因组中加入克隆位点，使其能非常方便的插入外源基因。外源基因选择有特异性的促进肿瘤细胞调亡、潜在"旁观者效应"、抑制肿瘤血管生成、诱导人 树突状细胞活化和成熟等免疫调节作用的IL-24基因。本实验在构建针对胰腺癌的双靶向腺病毒MUC1-ZD55的系统中加入IL-24作为治疗基因，进 行双靶向基因- - 病毒治疗的研究，为胰腺癌基因治疗研究提供一个理想的平台。
申请书主题词 IL-24；MUC-1启动子； 靶向基因-病毒治疗； 胰腺癌，治疗

负责人 王霞 项目批准号 30772539 学科代码 C03031906
项目名称 以NF-κB和Akt信号通路为靶向的肺癌基因治疗研究
申请书摘要本项目旨在建立以细胞生存信号通路为靶向的肺癌基因治疗新策略。我们前期研究结果及其它实验室的研究证实，IKK-NF-κB和PI3K- Akt信号通路在肺癌的生长和药物耐受中发挥关键作用，而更为重要的是我们发现了同时阻断这两条通路，能更有效抑制肺癌细胞生长并提高其对多种化疗药物敏 感性。本项目将以这两条信号通路为靶向，以小干扰RNA为基因阻断手段，筛选出能有效阻断这两条通路的关键信号分子及相应的小干扰RNA序列，构建含肿瘤 特异性表达的MAGE-A3基因启动子的癌细胞特异性shRNA（small hairpin RNA）表达系统，来同时阻断肺癌细胞内这两条信号通路，通过体内外试验，研究对肺癌细胞生长和药物反应性的影响，将为开拓肺癌基因治疗新途径奠定理论和 实验基础。由于MAGE-A3基因也在其他许多肿瘤表达，所建立的shRNA表达载体可拓展应用于其它肿瘤，因此本项目在肿瘤基因治疗领域具有更广泛的意 义
申请书主题词 肺癌基因治疗；NF-κB 信号通路；Akt信号通路；小干扰RNA

负责人 徐勇 项目批准号 30770577 学科代码 C010515
项目名称 PAMAM-D载双靶向自杀基因治疗前列腺癌的实验研究
申请书摘要肿瘤的基因治疗有着广阔的应用前景，但病毒载体的安全性限制了其发展。人工合成的生物活性材料基因载体成为研究的热点。本项目应用特殊修饰的树 枝状高分子为基因载体，旨在建立一个能够将自杀基因HSV-tk有效、安全、靶向转入前列腺癌细胞的输送表达系统。具体内容如下：（1）选用第5代阳离子 聚酰胺-胺型树枝状聚合物（G5-PAMAM-D）为基因载体，并用转铁蛋白（Transferrin，Tf）加以修饰，增加其对前列腺癌的靶向性。 （2）应用前列腺特异性膜抗原启动子/增强子来驱动自杀基因表达，在表达水平进一步靶向前列腺癌。（3）应用Connexins43(Cx43)基因和吉 西他滨（Gemcitabine）两种方法强化"旁观者效应"。通过体内外实验，验证这一以树枝状高分子为载体的HSV-tk/GCV自杀基因输送表达系 统的有效性，为进一步的临床试验提供理论依据。申请书主题词前列腺癌，基因治疗，靶向，非病毒载体、特异性启动子

负责人 张太平 项目批准号 30772113 学科代码 C03030303
项目名称 新型载体sc-rAAV介导的siRNA基因治疗逆转胰腺癌多药耐药的实验研究
申请书摘要多药耐药基因MDR1的表达是造成恶性肿瘤化疗失败的主要原因之一。由于85%以上的胰腺癌病人无法手术切除，化疗是其主要治疗手段，因此逆转 胰腺癌多药耐药成为临床亟待解决的问题之一。siRNA技术和基因治疗是近年来肿瘤研究的热点，siRNA可以成功地在体外逆转肿瘤细胞的MDR1表型， 但如何将其应用于体内成为其走向临床的瓶颈。本课题设想将基因治疗技术与siRNA技术相结合，利用新型载体- - 自我互补重组腺相关病毒载体（sc-rAAV），构建能够在体内迅速、高效、持久表达MDR1 siRNA的sc-rAAV，以我们新建立的MDR1高表达胰腺癌耐药细胞株SW1990/ADM和裸鼠种植瘤为模型，通过实时定量PCR、免疫印迹、流 式细胞仪和罗丹明摄取等方法检测其在体内外逆转胰腺癌MDR的效果。探索基因治疗逆转胰腺癌多药耐药的新途径，为siRNA技术应用于胰腺癌的临床治疗奠 定基础。经检索国内外尚未见同类报道。
申请书主题词 自我互补rAAV， siRNA，基因治疗，胰腺癌 ，多药耐药

30772100 乳腺癌肿瘤干细胞在乳腺癌发生和进展中的作用及治疗对策
申请书摘要用流式细胞技术和原位杂交技术测定不同TNM分期乳腺癌原发癌灶、转移癌结节及复发乳腺癌癌灶ESA+CD44+CD24-lin细胞含量，分 离培养乳腺癌干细胞，并检测乳腺癌干细胞表达CD133和CD44的水平；用裸鼠动物体内实验观察乳腺癌干细胞的生物学特性；用裸瘤鼠肿瘤模型进行变异型 CD133和CD44单克隆抗体激活及阻断乳腺癌干细胞的研究，观察干预前后乳腺癌干细胞增殖、浸润等生物学特点的改变。探讨乳腺癌干细胞与乳腺癌复发、 转移等生物学特性的相关因素；研究CD133和CD44在乳腺癌干细胞中的生物功能；明确治疗用CD133和CD44单克隆抗体调控乳腺癌干细胞的发育、 增殖等病理生理过程。对阐明乳腺癌转移、复发等生物学特性的分子机制，开辟恶性肿瘤转移、复发治疗的新靶点有重要意义。

30701007 叶酸-羧基化MWNTs复合载体应用于胰腺癌淋巴转移靶向治疗的实验研究
申请书摘要胰腺癌是恶性程度较高的肿瘤，淋巴转移是导致胰腺癌预后差的主要原因。胰腺癌淋巴化疗的关键因素是药物载体的选用。本课题拟将羧基化修饰的多壁 碳纳米管（MWNTs）作为新型的淋巴系统输送载体，以叶酸受体作为胰腺癌治疗的分子靶点，设计制备应用于胰腺癌淋巴靶向化疗的新型载体"叶酸-羧基化 MWNTs复合物"，并研究叶酸-羧基化MWNTs携带化疗药物在胰腺癌淋巴靶向化疗中的作用机制。通过对胰腺癌细胞株BxPC-3靶向抑制体外试验证实 其主动靶向结合和抑制作用；通过在体试验和裸鼠胰腺癌淋巴道转移模型，观察其体内的代谢过程和抗肿瘤作用，探索新型载体主动靶向治疗胰腺癌淋巴转移灶的应 用价值和抗肿瘤机制，为构建新型高效低毒的胰腺癌淋巴化疗的药物靶向输送系统提供理论指导和实验依据。

30772127 人胆囊癌SP细胞的分离、鉴定和其免疫原性耐药相关蛋白靶点的探索
申请书摘要恶性肿瘤难以治愈的根本原因之一是少数肿瘤细胞对化疗药物有明显的耐药性。SP细胞作为一种已经得到公认的潜在干细胞对化疗药物具有明显的抵抗 力及耐药性，使其能逃避化疗药物的杀伤而成为肿瘤复发和转移的种子。尤其是胆囊癌，即使进行了根治性切除和化疗，大部分患者因局部复发或和远处转移而在短 期内死亡。该项目综合应用流式分选技术以及细胞分子生物学技术分离、鉴定胆囊癌SP细胞和阐明其生物学特性。然后，将多种化疗药物作用于体内外胆囊癌SP 细胞、非SP细胞及普通胆囊癌细胞，分析它们对化疗药物的敏感性和耐药性，利用蛋白质组学的高通量技术优势和与免疫杂交技术相结合的研究策略,并结合生物 信息学系统分析、鉴定胆囊癌SP细胞的差异性免疫原性耐药相关蛋白质谱和制备其多克隆抗体，旨在探索胆囊癌SP细胞耐药相关蛋白靶点，为今后分离、鉴定胆 囊癌干细胞和进一步探索胆囊癌的耐药机制、耐药逆转手段、早期诊断标记抗原等奠定基础。

30772315 卵巢癌干细胞特异性分子标志物的筛选及其耐药性的研究
申请书摘要卵巢癌是死亡率最高的妇科恶性肿瘤，深入认识其发生、转移、以及耐药性产生的根本原因是改善预后的关键。现有研究显示，肿瘤干细胞在疾病的发 生、复发、以及转移中发挥着十分重要的作用，肿瘤的化疗失败可能与肿瘤干细胞的耐药性密切相关。肿瘤干细胞特异性分子标志物的识别和确定是癌干细胞研究中 需要解决的关键问题之一。本项目在深入卵巢癌化疗耐药机制研究的基础上，通过对人卵巢癌细胞系、人卵巢癌组织细胞、或卵巢癌患者腹水细胞的体外分离、鉴定 和培养，初步分离出具有干细胞特征的肿瘤细胞。采用肿瘤标志分子的差异表达蛋白质组分析技术，筛选卵巢癌干细胞的特异性分子标志物。在此基础上，进一步探 讨卵巢癌干细胞对化疗耐药的问题。

30771552 DOT1调节卵母细胞减数分裂的机制及其对胚胎早期发育的影响
申请书摘要我们的前期研究发现，采用SiRNA干涉GV期卵母细胞DOT1表达，引起卵母细胞成熟率下降和染色体分离异常。本研究在此基础上通过分析抑制 DOT1表达后染色单体黏连素、动粒蛋白、纺锤体检验点蛋白在染色体的存在与分布，探明DOT1影响卵母细胞减数分裂的机制。同时通过观察早期胚胎在抑制 DOT1表达后进一步的发育能力，研究DOT1对胚胎早期发育可能的影响，并通过检测卵裂球细胞的整体转录水平、染色体数目有无异常等研究DOT1影响胚 胎早期发育的机制。

30770808 卵特异性瓜氨酸蛋白MOP53在小鼠卵及早期胚胎发育中的作用
申请书摘要 卵特异性瓜氨酸蛋白MOP53是申请者近期发现的一种特异性表达于小鼠卵细胞胞膜和胞质的瓜氨酸化蛋白质，具有WD40 及F-box结构域，对其功能的研究至今尚无任何报道。本研究拟对该蛋白进行深入研究：制备特异性荧光素标记抗体，观察在卵细胞及早期胚胎发育过程中不同 时期该蛋白表达及其启动，迁移，定位等动态特征；通过体外磷酸化和瓜氨酸化检测其在卵细胞及早期胚胎发育中可能的重要作用；运用siRNA技术研究该基因 在卵子发生和早期胚胎发育中的功能，进而阐明MOP53参与卵子成熟和早期胚胎发育过程的分子机制；同时对比MOP53蛋白及其特异性抗体对体外精卵结合 和融合过程中的影响。本研究重要意义是发现可能参与卵子发生及早期胚胎发育过程中重要的发育生物学信息，并探讨该蛋白开发成为避孕疫苗靶抗原的可能性。

30660125 雌激素受体在鸡与鹌鹑属间杂交胚胎早期死亡中的作用机理研究
申请书摘要鸡与鹌鹑的杂交是禽类中比较典型的远缘杂交，杂交存在着不亲和现象，杂交种胚胎早期死亡可能与其性分化有关，雌激素受体在调控家鸡胚胎性分化中 起着重要的作用，但是否也在导致鸡与鹌鹑属间杂交种胚胎早期死亡中起了关键作用，其调控机制如何，目前还不清楚。针对此问题，本研究首先对鸡、鹌鹑及其属 间杂交种孵化早期胚胎进行组织切片观察，确定性分化的具体时间，在此基础上，利用原位杂交、定量PCR结合家禽性别PCR鉴定等技术，通过在性分化前利用 雌激素和芳香化酶抑制剂诱导性反转的鸡、鹌鹑及杂交种孵化早期胚胎，结合正常生长的早期胚胎（在性分化前后），对雌激素受体（ER）及其相关基因在早期胚 胎发育中，尤其在性分化中所起的作用进行研究，并深入探讨ER等基因导致杂交种胚胎早期死亡的作用机理，为从分子水平上解释杂交种胚胎早期死亡的可能机制 及探索克服杂交种胚胎早期死亡的可能途径奠定基础。

30671502 比较蛋白组学方法研究牛精子性别特异蛋白的分子基础
申请书摘要本项目采用比较蛋白组学的理论与技术，总结前人的经验教训，采用高纯度X、Y精子试验材料和适合于精子特点的方法制备精子蛋白质，通过二维电泳 分离X、Y精子中表达的蛋白，并通过软件分析找到差异表达的性别特异蛋白质，通过酶解消化，借助于一级质谱、串联质谱技术及生物信息学方法系统地鉴定精子 中性别特异表达的蛋白质，不仅为制备X或Y精子高效、特异抗体，建立新的可推广应用的快速、简便、低成本X、Y精子免疫分离方法，并最终实现牛及其它家畜 性别控制提供新的科学试验依据，而且为深入揭示精子性别形成及性别特异蛋白表达的分子基础，更深入地揭示哺乳动物性别形成提供理论依据，同时对于人类伴性 遗传疾病及性别的有效控制也具有比较重要的理论与现实指导意义。

项目批准号 30771996 学科代码C0302050202
项目名称： 肝纤维化、肝硬化及肝细胞癌的无创性诊断研究- - 用糖基化血清蛋白预测肝脏疾病
申请书摘要：临床肝活检资料显示，62.6%的轻度慢肝患者及100％重度慢肝患者中存在肝纤维化。若无及时有效的治疗，肝纤维化会进一步发展为肝硬化， 是肝病患者的主要死因，也是发展为肝癌的主要危险因素。但此病理过程若尽早被终止或逆转，其预后将会大大改善。但目前除肝活检外，所应用的肝纤维化辅助诊 断方法均不够理想，且多数病人不愿接受肝活检，因而导致错过最佳的诊断治疗时间。本研究拟建立适于亚洲人的无创性血清学检测法，检测肝病患者血清蛋白中聚 糖的改变，这种高特异性生物学标志物可及时反映肝纤维化进程，预警肝硬化及肝癌发生的危险度。该技术可使患者避免肝活检，并易于对慢肝患者进行随访。本研 究将利用DSA-FACE技术检测中国正常人及肝病患者血清聚糖标志物，确立与肝纤维化、肝硬化和肝癌相关的敏感特异的聚糖标志物的诊断标准，并跟踪随访 慢性肝炎患者，观察聚糖动态变化与肝纤维化进展的相关性，阐明聚糖的变化在肝纤维化进程中的作用。

项目批准号 30700863 学科代码 C03030307
项目名称：胶质瘤干细胞向瘤周脑组织的迁移特性及其治疗学意义
申请书摘要：恶性胶质瘤呈侵袭性生长方式，手术难以彻底清除侵入周围脑组织的肿瘤细胞，而这些残留肿瘤细胞对后续放疗、化疗等措施的显著抵抗性，最终导致 了肿瘤复发。前期实验发现，恶性胶质瘤与周围脑组织交界区有CD133+、nestin+肿瘤细胞存在；胶质瘤干细胞高表达反映迁移浸润能力的蛋白；结合 近来提出的"迁移的肿瘤干细胞"的概念，我们推测："向瘤周脑组织迁移的胶质瘤干细胞，可能是术后'残留灶'具有放疗、化疗抵抗性的重要原因，是恶性胶质 瘤复发的根源"。本研究拟接种转染荧光蛋白质粒的恶性胶质瘤细胞系于裸鼠脑内成瘤，体内外观察胶质瘤干细胞的空间分布、迁移、浸润特性及机制，并探讨恶性 胶质瘤与脑组织交界区内胶质瘤干细胞对化疗、放疗等治疗方式的敏感性及分子机制，研究结果可望为提高恶性胶质瘤综合治疗的疗效，提供新的实验依据。

项目批准号30700287学科代码 C03020303
项目名称：间质成纤维细胞在肿瘤发生发展过程中的作用
申请书摘要：肿瘤间质细胞，特别是间质成纤维细胞在肿瘤发生发展过程中发挥着重要作用。它既是细胞外基质的主要生产者，与肿瘤质地的软硬，包膜的形成有 关；又能分泌多种细胞因子，调节肿瘤内血管的新生和免疫细胞的招募与激活等。然而，由于成纤维细胞的多样化，动物模型的不完善，人们对各类成纤维细胞如何 影响肿瘤的生长，转移与排斥了解甚少。FSP-TK转基因小鼠的出现为成纤维细胞的体内研究提供了理想的动物模型，通过注射化学药物GCV可在肿瘤发生的 不同时期内，特异地清除或抑制体内或肿瘤中的成纤维细胞，进而观察肿瘤生长的变化。本项目拟采用肿瘤细胞移植，化学物致癌等方法从以下3个方面开展研 究：1）成纤维细胞对肿瘤包膜形成和肿瘤转移的影响与机制；2）肿瘤细胞与成纤维细胞之间的相互作用和时间效应；3）纤维化对化学物致癌过程的影响与机 制。揭示成纤维细胞及其产物在肿瘤发生和生长过程中的作用与机制，将为肿瘤的诊断和治疗提供新的理论依据。

项目批准号 30700794学科代码 C03030302
项目名称：肿瘤相关成纤维细胞在肝癌侵袭、转移中的作用研究
申请书摘要：肿瘤微环境和肿瘤细胞之间是密不可分的功能整体。肿瘤微环境在癌症的发生、发展和转移中的作用日益受到重视，已经成为探索预测肿瘤预后和防治 肿瘤的新热点。肿瘤相关成纤维细胞（TAF）是肿瘤微环境内最主要的非炎症、免疫细胞成分，在多种肿瘤的发生、发展和转移中均具有重要作用，但在肝癌方面 的研究还比较零星。我们拟在既往对肝癌微环境系列研究的基础上，深入研究TAF与肝癌侵袭、转移潜能的关系；利用组织细胞原代培养法和我所拥有的转移潜能 不同的肝癌细胞系，研究TAF与肝癌细胞之间的相互作用；利用信号传导分类基因芯片，筛选肝癌细胞与TAF相互作用的信号传导通路，以探索肝癌细胞与 TAF相互作用的可能机制，为将来设计阻断"肝癌细胞与TAF相互作用促进肝癌侵袭、转移"的药物提供新的靶点，为探索新的预防肝癌根治性切除术后复发、 转移的方法提供实验依据。

项目批准号 30770897学科代码 C03030201
项目名称：急性心肌梗塞后室性心律失常和凝血酶受体的激活

申请书摘要：急性心梗后室性心律失常是心梗后死亡的主要原因。但其发生机理未明。有许多证据显示凝血酶有能引起室性心律失常的分子生物学基础并证实它在灌 注的心脏中能引起室性心律失常。科题负责人目前证实凝血酶能提高胚胎干细胞分化而来的心肌样细胞的自律性，用分子基因工程改造的胚胎干细胞分化而来的心肌 样细胞表达大量的凝血酶受体时不仅其自律性增加，而且其对凝血酶的反应也增加.凝血酶受体在心梗后的表达也显著增加。我们还证明了在大鼠心梗摸型中凝血酶 拮抗剂能减少心梗后室性心律失常的发生但受体激动剂能增加心梗后心律失常的发生，而且这些作用和KATP通道相关。进一步我们需要探索凝血酶受体作用的细 胞电生理基础和信号转导机制。

项目批准号 30770901学科代码 C03030201
项目名称：p75 NTR信号途径对心肌梗死后神经增生的调控及与跨室壁电异质性的关系
申请书摘要：心肌梗死后猝死的预防一直是临床工作的重点与难点，交感神经过度增生的发现为心肌梗死后猝死的机制探索提供了新思路。本研究拟采用健康兔制备 心肌梗死模型，通过免疫荧光、分子生物学和膜片钳等技术探讨神经生长因子受体p75NTR及其信号通路对心梗后跨壁三层心肌组织中交感神经过度增生分布影 响及其与复极离散度和跨室壁通道电流的关系，并进一步探讨可能的分子机制。本项目以p75 NTR为切入点，探讨心梗后心室内交感神经增生与电重塑的关系，旨在揭示心梗后恶性心律失常及猝死发生的机制和始动因素，以便早期采取有效的手段干预，使 心脏神经的增生达到适度的平衡和均匀状态，可能对心梗后猝死的预防起到更积极的作用。

项目批准号 30770802学科代码 C010706
项目名称：k-阿片受体通过调节缝隙连接蛋白Cx43参与抗缺血性心律失常的研究
申请书摘要：心肌的缝隙连接是细胞间电传导协调有序的重要保证。最新研究表明，心肌缺血不仅有交感神经兴奋引起的心肌细胞内钙增高，而且可使心室肌缝隙连 接的主要功能蛋白Cx43出现功能异常，引起缝隙连接出现电脱藕联而致心律失常。本课题组研究表明，k-阿片受体激活后可影响交感神经的兴奋性和抑制交感 递质的释放及抑制beta-受体的作用，它有可能通过抑制缺血时交感和beta-受体兴奋引起的心肌细胞内钙升高，从而间接(或可能直接)改善Cx43的 功能改变，抑制缺血性心律失常的发生。本研究拟以大鼠心肌缺血为模型，采用电生理学、Western blotting、免疫荧光标记和激光共聚焦显微技术等，首次研究心肌k-阿片受体对Cx43的调节作用及两者的空间结构关系，阐明Cx43在阿片受体介 导的抗缺血性心律失常中的作用机制。预期结果可为认识缺血性心律失常提供新的学术见解，也可为临床应用阿片类物质防治缺血性心律失常提供科学依据。

30760248 学科代码 C03030304
项目名称 Endoglin基因修饰肿瘤/DC杂交细胞诱生靶向特异性抗人肺癌CTL疫苗的研究
申请书摘要 Endoglin(EDG)是肿瘤新生血管内皮细胞膜表面蛋白，是肿瘤血管生成的标志性分子之一。树突状细胞(DC)是体内抗原提呈功能最强的抗原提呈细 胞。本研究拟在完成省自然科学基金子课题"抗肺癌DC疫苗研究"和国家自然科学基金项目的子课题"EndoglinDNA疫苗诱导抗癌免疫反应"的基础 上，以体内癌细胞和肿瘤新生血管内皮细胞为直接目标，依据肿瘤抗原提呈给T细胞的机理，将转染鼠EDG表达基因的原代培养的肺癌患者癌细胞与患者的DC融 合成杂交细胞，该细胞与患者的T细胞混合培养诱生特异性CTL，完成体外细胞毒实验。用原代培养的人肺癌细胞与重建肺癌病人免疫系统的SCID鼠建立肿瘤 动物模型，将转染鼠EDG基因的荷瘤鼠癌细胞和荷瘤鼠DC融合成杂交细胞后，再与荷瘤鼠T细胞混合培养，诱生扩增的CTL回输至荷人肺癌SCID鼠体内， 研究其对体内癌细胞和肿瘤血管内皮细胞直接产生"双重"细胞毒作用所诱导的抗癌效应。

30760073 学科代码 C03020303 项目名称 重组endoglin与细菌表面抗原分子疫苗抗肿瘤作用研究
申请书摘要肿瘤血管生成是肿瘤的生长与转移的必要条件，endoglin主要分布于肿瘤新生血管的内皮细胞和肿瘤周围组织的细胞表面，是肿瘤血管生成标志 性分子。研究已经表明，使用抗endoglin单克隆抗体被动免疫治疗可以有效抑制肿瘤生长和转移。但是，单克隆抗体被动免疫治疗存在许多不足，本研究拟 利用基因工程技术，将endoglin胞外段基因序列插入大肠埃希氏菌表面抗原蛋白分子Ag43中，将endoglin作为Ag43分子的一部分（嵌合于 Ag43中）让大肠埃希氏菌展示于细菌表面，提取并纯化这一嵌合的Ag43-endoglin重组蛋白，然后用作疫苗主动免疫小鼠肿瘤模型，了解是否能诱 导免疫系统产生抗endoglin的体液免疫反应，从而达到主动免疫治疗肿瘤的目的，进而研究其作用机理，为肿瘤免疫治疗探讨一种新的方法。
 

30770492 脂筏通过质膜Ca2+-ATPase调控细胞Ca2+外流的机理
申请书摘要生物膜具有脂筏结构且作为功能平台参与众多生物学功能的观点已日益被广泛接受，但脂筏调控膜蛋白功能的机理尚不清楚。本申请以质膜 Ca2+-ATPase（PMCA）为研究目标，研究其在细胞质膜上的定位及其受脂筏调控的机理。已知PMCA位于脂筏上并具有较高活性，而非脂筏区上的 PMCA活性较低，但脂筏调控PMCA活性的机理尚不清楚。我们在刚结题的基金委重点基金资助下，发现脂筏的主要成分之一－神经节苷脂调控PMCA的活 性。本申请以在体和体外重组相结合，通过分子生物学、蛋白质生化、细胞生物学、生物物理等技术和方法，在体调控细胞质膜的脂筏结构或体外建立人工脂筏模型 重组PMCA，研究鞘脂、Caveolin等脂筏内含的特异性脂和蛋白与PMCA的相互作用，验证脂筏动态聚集与解聚调控PMCA功能的假说，阐明脂筏调 控PMCA功能的分子机理。

20772077 脂筏微区超分子聚集体结构的动态特征与稳定性研究
申请书摘要生物膜中脂筏微区结构的变化与一些疾病密切相关，其关键因素是脂筏微区结构的动态特征与稳定性决定着生物膜的功能，针对这一关键问题，本项目提 出从动物细胞提取脂筏与体外模拟脂筏相结合的研究入手，从超分子水平对脂筏微区结构展开研究。主要研究目标的框架是：(1) 通过从动物细胞提取脂筏，对其形态、结构及成分进行定性、定量研究, 揭示脂筏微区结构的动态特征、稳定性与生物功能之间的关系；(2) 通过模拟脂筏微区结构，重点对二元体系和三元体系的超分子聚集体结构的多形性进行研究和探索，逐步向活细胞层次推进，弄清该复杂过程中鞘脂、胆固醇和特殊 蛋白质之间如何形成脂筏微区、脂筏微区结构之间如何相互转化以及特殊蛋白质对脂筏微区结构影响等关键问题; (3) 通过动物细胞提取脂筏与体外模拟脂筏相结合的方法，从超分子水平阐明脂筏微区结构与功能的生物学意义，为多种疾病发病机理的研究和治疗方法的开发提供理论 依据和实验支持。

30471973 PPARγ在胃肠道肿瘤和正常组织放射和细胞毒药物损伤中的作用
申请书摘要腹部和盆腔肿瘤的放射治疗和化疗常造成正常组织的损伤。因此，如何降低正常组织的损伤，提高肿瘤的局部控制率是肿瘤放射治疗和化疗的难题。由于 对胃肠道正常组织损伤的分子生物学机制知之甚少，所以利用分子生物学方法或分子生物学靶向药物预防和治疗胃肠道正常组织放化疗损伤还是一块待开发的领域。 胃肠道放化疗损伤在组织病理学上表现为早期炎性反应和细胞的代偿性增殖。PPARγ具有抑制炎性反应、抑制细胞增殖、促进细胞凋亡、抑制肿瘤生长等作用。 PPARγ在多种细胞中特别是胃肠道组织和胃肠道肿瘤中高表达。但是，PPARγ在胃肠道肿瘤和正常组织放射损伤或细胞毒性药物治疗中的变化，以及 PPARγ活化后对胃肠道正常和肿瘤组织细胞毒性和放射损伤的影响、分子生物学变化，还未见报道。因此，研究PPARγ在胃肠道正常和肿瘤组织放射损伤和 细胞毒性药物损伤中的作用，将具有创新性意义和临床实用价值。

30730005 肠道微生物群落的结构动力学与功能解析研究
申请书摘要肠道菌群是自然界最为复杂和最为重要的微生物群落类型之一，解析其结构和功能的关系是国际学科前沿课题，对人体健康也意义重大。本项目拟以高脂 饮食＋STZ诱导的实验性2型糖尿病大鼠为模式系统，利用针对16S rRNA 基因的PCR-DGGE、T-RFLP指纹图技术和高通量短标签测序技术，对糖尿病大鼠、造模抵抗大鼠和健康对照肠道菌群进行动态监测及动力学研究，结合 生理生化指标测定，利用多变量相关分析，对比大鼠肠道菌群结构的特征性差异，寻找与疾病直接相关的肠道菌群分子分类标记，并以此引导对可培养的功能菌类群 的分离和功能验证；同时，对筛选出的典型个体的肠道元基因组用454技术进行大规模测序、拼接和基因预测，发现生境专一性基因类型。从而建立通过群落结构 和功能动力学变化分析，来鉴定参与疾病发生发展过程的重要肠道功能菌和功能基因的技术方法，力求深入理解宿主与菌群的互作机制，并为人类元基因组研究开拓 新的技术路线。

50375093 基于逆向工程的人体髋关节生物形态与匹配特性研究
申请书摘要有效地增强人工假体与骨结合面的长期稳定性是提高髋部人工关节置换手术远期效果的关键。本项目以人体髋关节生物标本为对象，以逆向工程技术的原 理、方法为支撑，研究人体髋臼的测量、建模、分析方法，建立其可控的参数化模型，通过对几何形状的统计分析，揭示人体髋臼的自然生物形态，通过接触力学分 析、快速原型及医学试验验证所建立几何模型的合理型。建立可作为人工假体设计依据的基础数据库，为人工假体设计的更趋合理提供依据，

申请书主题词 逆向工程;人体关节;几何形态;接触有限元分析
结题中文摘要长期以来，人工髋关节的关节头和髋臼窝的几何形状一直停留在球体的简化假设上。这种简化一方面加大了头臼承载接触时的应力集中，使得臼窝的局 部磨损加重；同时为手术时半球型髋臼假体与人体髋臼骨界面的密贴造成困难，所以，在大量的医学解剖实践中，这种简化假设的合理性一直受到许多的骨外科专家 的怀疑。从而出现了大量定制式人工关节的研究与实践，定制式人工关节，虽然可较好解决人工关节头臼间的配合问题，但是这种方式大大增加了人工关节的制造难 度和成本。本项目提出了一种基于逆向工程的人体髋关节生物几何形态分析和建模方法。旨在以人体髋骨标本实物为对象，以反求工程的理论技术方法为支撑，建立 参数可控的人体髋臼的生物形态几何模型；通过对一定量髋骨标本的统计分析，提供以上述可控参数为特征值的人工髋关节系列，并建立人体髋骨外形结构参数与关 节系列的对应关系，以便在少量CT或X光片数据的指导下，为临床实施选择提供依据。通过研究成果开发，构建了集模型测量、数据处理、建模分析于一体的人体 关节几何形态分析与建模系统，并与上海第九人民医院骨科进行了合作，进行了临床应用研究，提出一种全新的旋转椭球体模型。

30670576 基于影像特征的椎体成形术精确建模及临床应用研究
申请书摘要 在实施椎体成形术前后分别对骨质疏松性压缩性骨折椎体进行CT 、MRI扫描，融合CT、MRI影像信息，建立精确的几何模型，进一步建立多孔弹性有限元模型，研究椎体的应力-应变的分布特征和形变特征，借助工程断裂 力学方法研究椎体骨质疏松性压缩性骨折的机理、应用骨水泥修复椎体骨折的机理。对椎体成形术过程中应力-应变的发展进行检测、分析和模拟。完成骨水泥的注 入剂量、分布和注入方式对椎体成形术效果的定性和定量关系的研究。探索椎体成形术后对临近椎体载荷传递影响机理和导致临近椎体发生新骨折的生物力学机理。 从而研究一种介入治疗的图像仿真系统，为椎体成形术基于病人个体特征治疗的实施方案的有效性、安全性和预期效果提供一种检测、分析和评估新技术。预期的模 型、算法和应用软件将对椎体成形术的手术指导和治疗效果评估产生重要影响。

30671101 建立北方地区成人腰椎椎骨形态学和生物力学数据库
申请书摘要 "有限元"这一概念在上世纪40 年代提出。Belytscho 最早建立了脊柱三维有限元模型。有限元分析法能在一定程度上代替生物力学实验,并能对实验条件进行控制和模拟活体下的力学情况。但是有限元分析法在脊柱生 物力学研究中仍有许多问题亟待解决，其中最主要的是: 椎骨、韧带等组织的力学性质极其复杂, 难以得到足够和可靠的测定数据。本项目设计：1、通过生物塑化薄层切片技术、SEQCT和螺旋CT等方法直接和间接测量成人新鲜腰椎椎骨，获得腰椎的表面 和内部的形态学数据，并通过三维重建技术获取均一化的标准成人男性和女性腰椎三维模型；2、根据椎骨的内在和外在的结构特点，将腰椎的皮质骨和松质骨分成 不同亚区，按照性别、年龄段、正常和异常组，通过力学试验获得各亚区的生物力学参数, 为腰椎有限元模型提供足够和可靠的测定数据。3、利用所获得的腰椎形态学和生物力学数据，进行腰椎的有限元分析，建立精细三维腰椎有限元模型。

10772176 基于医疗图像的人体上肢的血液流动和传热传质的计算模拟
申请书摘要本研究的目的是要对人体真实形状的三维上肢的血液流动和传热传质现象进行数值模拟。在考察人体的血液流动,末梢温度调节及氧气输送机理的同时, 为新一代人体假肢的开发,药物输送,血糖的非侵入检测以及脑部的低温治疗等提供实验平台。利用CT,MRI等医疗图像数据建立人体几何模型并进行数值解析 是生物力学研究中新型的重要建模方法。本研究将利用MRI医疗断面图像取得人体上肢形状的数据以建立计算网格模型。在此基础上结合血流动力学模型，自律神 经系统模型和生物组织的传热传质数学模型,应用有限元法再现人体上肢的血液流动特性及传热和氧气输送特性。同时，利用非侵入测试技术（超声波血流仪，红外 摄影仪等）对人体在不同环境下的血流和温度变化进行测量，为建立数学模型提供依据。

项目批准号 30772199 学科代码 C03030306
项目名称：COL6A1基因及其产物与黄韧带骨化的相关性研究
申请书摘要：黄韧带骨化、后纵韧带骨化和弥散性特发骨肥大症均属于脊柱韧带骨化，对于这种异位骨化的发病机制尚不十分清楚。研究表明COL6A1基因是后 纵韧带骨化和弥散性特发骨肥大症共同的相关基因；最近我们的研究结果显示COL6A1基因启动子区多态性与黄韧带骨化发病存在显著相关性。因此研究 α1(Ⅵ)型胶原和Ⅵ型胶原在脊柱韧带骨化病理生理中的作用机制有重要作用。我们准备进一步筛查COL6A1基因启动子区存在的SNPs，明确它们与黄韧 带骨化的关系。另外分别应用COL6A1基因过表达技术、Ⅵ型胶原作为体外支架培养以及Ⅵ型胶原经蛋白酶溶解后的水溶性降解产物作为细胞培养添加物等方法 从不同角度了解Ⅵ型胶原在MSCs向成骨细胞方向分化过程中和成骨细胞功能表达中的作用。另外通过分别单独阻断FAK表达和ERK1/2磷酸化过程明确Ⅵ 型胶原和其降解产物是如何通过FAK和ERK1/2信号通路参与调控MSCs分化和成骨细胞功能表达。

项目批准号 30600829 学科代码 C030504

项目名称：益气化瘀软坚法调控BMP-Runx2信号转导延缓颈椎OPLL的研究
申请书摘要：后纵韧带骨化(OPLL)是后纵韧带内的异位骨形成，常发生在颈椎。它压迫脊髓、脊神经根和脊髓前动脉，产生严重脊髓损害和神经根刺激症状， 是一种难治性疾病。本课题在建立人类颈椎后纵韧带成纤维细胞培养方法的基础上，通过BMP-2诱导，建立体外OPLL模型，采用细胞学、药理血清学、分子 生物学等技术，深入研究BMP-Runx2信号转导通路及上、下游相关信号分子在OPLL形成过程中的作用机理，观察益气化瘀软坚方、益气方、化瘀方、软 坚方和硫酸软骨素对Runx2、Osterix、Smad1、Smad5、Osteopontin、ALP、I型、Ⅱ型、Ⅹ型胶原、MMP-13基因与蛋 白表达的影响，综合评价这些中药小复方调控BMP-Runx2相关信号转录因子的过程，探索益气化瘀软坚法延缓OPLL发病的机理、寻找中医药治疗有效靶 点，从中医"气血理论"、"痰瘀理论"的角度探索益气化瘀软坚法延缓OPLL的具体含义。

30772022 磷酸酯酶在HSP70抑制LPS所致炎症反应中的作用研究
申请书摘要本项目从磷酸酯酶角度探讨HSP70抑制NF-κB活化及炎症反应的机制。采用LPS刺激RAW264.7小鼠巨噬细胞诱发炎症反应。通过转染 HSP70基因或其反义寡核苷酸，观察HSP70过表达或表达抑制对LPS所致炎症介质表达、ΙκB降解、NF-κB/P65核移位的影响，并采用 EMSA及荧光素酶报道基因技术研究HSP70对NF-κB的DNA结合活性及转录活性的影响。应用酶催化其底物反应的原理，分析巨噬细胞经HSR或转 HSP70基因后磷酸酯酶总活性及磷酸酯酶2A（PP2A）活性的变化。采用免疫共沉淀技术，探讨HSP70是否与PP2A或ΙκB激酶（ΙKK）的亚单 位具有相互作用，在此基础上进一步进行蛋白质相互作用的功能结构域分析。采用无细胞体系，在体外观察HSP70对PP2A或ΙKK活性的影响。开展本研究 可望发现HSP70控制炎症反应的新的重要靶分子，为SIRS等炎症性疾病的防治提供新思路。

30770945 气道中性粒细胞炎症中IL-4诱导肺血管内皮细胞CXCL-8产生的信号途径的研究
申请书摘要气道炎症是呼吸系疾病最常见的发病机制，而中性粒细胞是引起气道炎症的主要细胞之一。气道炎症中中性粒细胞聚集的机制不完全清楚。其中，肺血管 内皮细胞在调节气道炎症的集聚和迁移中起着重要的作用。CXCL-8是至今发现的最强的中性粒细胞趋化因子。而IL-4在气道炎症的发生和发展中起关键作 用。我们前期研究发现IL-4不仅刺激中性粒细胞分泌CXCL-8，同时上调肺血管内皮细胞CXCL-8的表达。但是IL-4诱导肺血管内皮细胞产生 CXCL-8的信号途径尚无研究报道。我们推测在肺血管内皮细胞中存在IL-4/NF-κB/CXCL-8和（或）IL-4/MAPK/CXCL-8信号 传导途径。IL-4通过上述途径诱导肺血管内皮细胞CXCL-8的表达以促进气道中性粒细胞炎症。本课题通过对IL-4诱导肺血管内皮细胞CXCL-8表 达的信号途径的研究, 探讨气道中性粒细胞炎症的机制，为改善气道中性粒细胞炎症寻找新的作用靶点。

30772098 Kupffer细胞中LXRα通过GRIP1抑制IRF-3活性负性调控炎症反应的分子机制
申请书摘要巨噬细胞中肝X受体(LXR)α在脂代谢与免疫调控中起关键作用，是两者之间的交汇点。一方面，在共激活因子CBP协同下,各种炎症刺激信号通 过干扰素调节因子3（IRF3）特异性抑制LXRα的转录活性。另一方面，LXRα又可抑制IRF3介导的多种炎症信号传导。但LXRα负性抑制IRF3 活性的机制尚不清楚。因此，阐明LXRα抑制IRF3的抗炎机制，对机体调控炎症反应和促进脂代谢具有双重意义。新近发现，GRIP1是IRF3转录激活 中非常重要的共激活因子，而LXRα结构上又有GRIP1结合位点，推测LXRα、GRIP1和IRF3三者之间存在相互作用关系。本项目选择肝 Kupffer细胞为靶细胞，从转活化抑制和基因调控角度出发，利用免疫共沉淀等技术，研究LXRα通过GRIP1对IRF3的抑制作用，探讨LXRα调 控IRF-3活性、负性调节炎症反应的分子机制，为阐明LXRα确切的抗炎机制作一些探索性的工作。

30772022 磷酸酯酶在HSP70抑制LPS所致炎症反应中的作用研究
申请书摘要本项目从磷酸酯酶角度探讨HSP70抑制NF-κB活化及炎症反应的机制。采用LPS刺激RAW264.7小鼠巨噬细胞诱发炎症反应。通过转染 HSP70基因或其反义寡核苷酸，观察HSP70过表达或表达抑制对LPS所致炎症介质表达、ΙκB降解、NF-κB/P65核移位的影响，并采用 EMSA及荧光素酶报道基因技术研究HSP70对NF-κB的DNA结合活性及转录活性的影响。应用酶催化其底物反应的原理，分析巨噬细胞经HSR或转 HSP70基因后磷酸酯酶总活性及磷酸酯酶2A（PP2A）活性的变化。采用免疫共沉淀技术，探讨HSP70是否与PP2A或ΙκB激酶（ΙKK）的亚单 位具有相互作用，在此基础上进一步进行蛋白质相互作用的功能结构域分析。采用无细胞体系，在体外观察HSP70对PP2A或ΙKK活性的影响。开展本研究 可望发现HSP70控制炎症反应的新的重要靶分子，为SIRS等炎症性疾病的防治提供新思路。

30770945 气道中性粒细胞炎症中IL-4诱导肺血管内皮细胞CXCL-8产生的信号途径的研究
申请书摘要气道炎症是呼吸系疾病最常见的发病机制，而中性粒细胞是引起气道炎症的主要细胞之一。气道炎症中中性粒细胞聚集的机制不完全清楚。其中，肺血管 内皮细胞在调节气道炎症的集聚和迁移中起着重要的作用。CXCL-8是至今发现的最强的中性粒细胞趋化因子。而IL-4在气道炎症的发生和发展中起关键作 用。我们前期研究发现IL-4不仅刺激中性粒细胞分泌CXCL-8，同时上调肺血管内皮细胞CXCL-8的表达。但是IL-4诱导肺血管内皮细胞产生 CXCL-8的信号途径尚无研究报道。我们推测在肺血管内皮细胞中存在IL-4/NF-κB/CXCL-8和（或）IL-4/MAPK/CXCL-8信号 传导途径。IL-4通过上述途径诱导肺血管内皮细胞CXCL-8的表达以促进气道中性粒细胞炎症。本课题通过对IL-4诱导肺血管内皮细胞CXCL-8表 达的信号途径的研究, 探讨气道中性粒细胞炎症的机制，为改善气道中性粒细胞炎症寻找新的作用靶点。

30772098 Kupffer细胞中LXRα通过GRIP1抑制IRF-3活性负性调控炎症反应的分子机制
申请书摘要巨噬细胞中肝X受体(LXR)α在脂代谢与免疫调控中起关键作用，是两者之间的交汇点。一方面，在共激活因子CBP协同下,各种炎症刺激信号通 过干扰素调节因子3（IRF3）特异性抑制LXRα的转录活性。另一方面，LXRα又可抑制IRF3介导的多种炎症信号传导。但LXRα负性抑制IRF3 活性的机制尚不清楚。因此，阐明LXRα抑制IRF3的抗炎机制，对机体调控炎症反应和促进脂代谢具有双重意义。新近发现，GRIP1是IRF3转录激活 中非常重要的共激活因子，而LXRα结构上又有GRIP1结合位点，推测LXRα、GRIP1和IRF3三者之间存在相互作用关系。本项目选择肝 Kupffer细胞为靶细胞，从转活化抑制和基因调控角度出发，利用免疫共沉淀等技术，研究LXRα通过GRIP1对IRF3的抑制作用，探讨LXRα调 控IRF-3活性、负性调节炎症反应的分子机制，为阐明LXRα确切的抗炎机制作一些探索性的工作。

项目批准号30571868 学科代码：C03030306
项目名称：应力在胸椎黄韧带骨化中分子机制的研究
申请书摘要：胸椎黄韧带骨化的发病机制和有效防治一直是临床医学的棘手难题。该病起病隐匿、致瘫率高、手术危险性大、复发率高，近年来发病呈上升势头。本 课题组前期的临床和病理研究发现：局部力学损伤很可能是该病发生发展的关键环节。故本课题拟：以应力为切入点，培养正常及患者手术后胸椎黄韧带细胞，使其 接受不同应力以及高危因素作用后，观察细胞的增殖能力、各项成、抑骨基因、因子及成骨生化等指标的影响，以期探明应力促进骨化的条件和范围。进一步观察应 力对细胞的Ca离子通道、整合素家族等通路的影响及其与成、抑骨基因的关系，探索上述过程的启动环节、下游事件、不同事件间的相互关系及调控机制，从而彻 底阐明胸椎OLF的细致机制，为临床解决该病的早期诊断、有效防治等问题提供理论基础。本课题前期工作已有10篇论文发表，查新未见国内外有类似报道，提 示具有明显的源头创新性

项目批准号30701129 学科代码C03050401
项目名称：基于间充质干细胞向软骨分化过程研究“肾主骨”的物质基础
申请书摘要："肾主骨"是中医藏象学说的核心理论之一，探讨其物质基础至关重要。中医"肾精"概念和干细胞理论在内涵和外延上的相似之处提示：从间充质干 细胞向软骨分化过程着手，可能是揭示"肾主骨"本质的理想切入点。本研究以软骨组织工程技术为研究平台，将骨髓间充质干细胞植入聚乙醇酸三维支架中，诱导 向软骨细胞分化。分别在体外培养体系、SCID小鼠组织移植模型、关节炎软骨损伤动物模型中，运用组织学、免疫组织化学、流式细胞仪、Real time -PCR、western－blot、基因芯片等方法，从组织形态学、细胞和分子水平观察补肾益精中药代表方左归丸对间充质干细胞向软骨分化过程的影响， 从干细胞层面阐明"肾主骨"理论的形态学和分子基础。本研究将为丰富中医藏象学说提供理论基础，并对中医药在干细胞和软骨损伤研究中的运用有重要指导意 义。

项目批准号30770542 学科代码C010509
项目名称：ChM-1对于稳定MSC分化软骨细胞表型的意义
申请书摘要：间充质干细胞（MSC）是软骨组织工程种子细胞的重要来源，但应用MSC构建的软骨长期体内移植后往往失去表达II型胶原的能力。正常软骨是 一种乏血管的组织，有大量的ChM-1表达,该蛋白具有强烈的血管生成抑制作用。我们推测MSC在向软骨细胞分化过程中ChM-1的表达可能较弱，甚至不 表达，从而导致MSC分化而来的软骨组织在体内易发生血管化而导致表型丢失。但迄今为止关于ChM-1基因在MSC及其分化的软骨细胞中是否表达尚无文献 报道。本课题首先比较MSC和关节软骨细胞形成的软骨组织表达ChM-1的差异；进而将ChM-1转染的MSC和ChM-1表达被阻断的软骨细胞所形成的 软骨组织进行体内移植，观察软骨组织表型变化；最终用ChM-1转染的MSC修复关节软骨缺损，评价其应用前景。本研究有望揭示MSC来源软骨组织体内移 植后表型丢失的机制，为获得理想的软骨组织工程种子细胞提供新的思路。

项目批准号30600762 学科代码C03020702
项目名称：基于淫羊藿苷诱导的胚胎干细胞发育依赖性基因相关的蛋白质组学与功能研究
申请书摘要：本项目基于淫羊藿苷介导小鼠胚胎干细胞体外定向分化为心肌细胞过程中对心肌发育依赖性基因表达的调控研究，拟进一步构建胚胎干细胞定向分化为 心肌细胞的蛋白质表达模式和功能模式，及药物调控的生物学特征；论证并阐明药物诱导胚胎干细胞定向分化潜能改变过程中，心肌发育依赖性基因组学与蛋白质组 学之间的内在联系；探索与药物调控胚胎干细胞定向分化密切相关的蛋白质作用模式、功能机制以及蛋白质群体内相互作用。

项目批准号30471860 学科代码 C030309
项目名称：近视眼发展过程中“生长““停止“信号的蛋白质组研究
申请书摘要：近视是世界上最常见的眼部疾病。病理性近视可对患者视功能造成不可逆性损害。而近视的发病机理尚未完全阐明。本研究建立猴形觉剥夺近视眼动物 模型，用比较蛋白质组的方法对正常组、形觉剥夺组、形觉剥夺恢复期组的视网膜神经层、视网膜色素上皮层（包括脉络膜层）、巩膜的蛋白质进行分离比较，对差 异蛋白进行鉴定，从mRNA及蛋白水平对差异蛋白进行进一步确认，并将三层组织差异鉴定所得结果归纳总结，寻找控制近视眼发展的"生长"及"停止"信号， 明确视网膜-脉络膜-巩膜的信号级联系统，从全新的角度全面阐明近视眼的发病机理，以期在将来能充分利用"停止信号"控制近视的发展，避免由病理性近视对 患者视功能所造成的损害，并大大降低用于近视眼治疗的费用，产生极大的社会和经济效益。

于烨 项目批准号 30700145 学科代码 C010505
项目名称 以酸敏感离子通道磷酸化为靶标的脑缺血神经保护研究
申请书摘要脑缺血性疾病严重威胁人类健康。以谷氨酸受体为靶点的神经保护药物在临床应用中的缺陷促使人们寻求与缺血损伤有关的新型信号通路。脑缺血常伴随 严重的组织酸化。酸敏感离子通道(acid-sensing ion channel，ASIC)可感受组织酸化；其1a亚基同聚体通道(ASIC1a)具有Ca2+通透性，已成为神经保护的新靶点。我们过去的研究表明，缺 血过程中Ca2+/钙调素依赖性蛋白激酶II(CaMKII)介导的ASIC1a胞内C末端磷酸化可加剧缺血引发的损伤，但其具体的机制并未明确。本课题 拟采用膜片钳电生理技术，并结合细胞与分子生物学手段，进一步探讨ASIC1a磷酸化的分子机制，在此基础上，设计合成以ASIC1a C末端磷酸化为靶标的跨细胞膜干扰肽,以期对缺血引发的损伤进行有效干预。该研究有望揭示ASIC介导缺血损伤的机制，为研究特异性肽类神经保护新药提供 先导化合物，并发现更有效的神经保护措施。

张陈平 项目批准号 30772430 学科代码 C03031102
项目名称 唾液腺腺样囊性癌细胞中酸敏感离子通道的特性和功能研究
申请书摘要缺氧和组织酸化是恶性肿瘤最为常见的病理变化之一，但肿瘤细胞如何感受pH的变化，以及如何将细胞外的信号转换成细胞内信号，目前还不甚清楚； 并且组织酸化可以激活与肿瘤侵袭转移相关的基质金属蛋白酶。唾液腺腺样囊性癌(SACC)具有嗜神经侵袭及远处转移的生物学特性，研究表明可能与肿瘤细胞 向神经细胞分化，以及一些营养因子与细胞膜上相应受体的相互作用有关。目前已发现有特异性神经细胞标志物S100、GFAP等的表达，但对SACC细胞膜 受体蛋白的研究甚少。酸敏感离子通道(ASICs)就是神经细胞膜上一类可以被酸性溶液直接激活的通道蛋白，并且ASICs的表达与神经胶质瘤的恶性程度 和侵袭性呈正相关。该课题将借助电生理膜片钳技术，结合细胞化学和分子生物学手段，观察SACC细胞膜上ASICs的表达，分析其特性，了解其在SACC 细胞的增殖、分化和侵袭转移中的作用，以期为临床治疗及新药的研发提供新的理论依据和作用靶点。

高隽 项目批准号 30500116 学科代码 C010506
项目名称 酸敏感离子通道参与脊髓背角神经元感觉信息传递的机理
申请书摘要疼痛是一种与组织损伤或潜在的损伤相关的不愉快的主观感觉和情绪体验。它包括伤害性刺激作用于机体所引起的痛感觉，以及机体对伤害性刺激所做的 痛反应。组织酸化就是这样一种常见的生理和病理性刺激，降低的pH值不仅可以调节相关的膜蛋白特性，如电压敏感的Na+通道、谷氨酸受体等，而且还可以直 接激活酸敏感离子通道（ASICs）。另外，当外周刺激激活痛觉感受器产生的冲动，通过特异的传入纤维传至脊髓背角，刺激谷氨酸、P物质等化学性物质释放 的同时，囊泡中的H+也一起被释放到突触间隙，兴奋背角投射神经元，经上行通路传递到脑干网状结构，在丘脑的不同核团进行整合加工，最后到大脑皮层产生痛 觉。正是因为痛觉通路受到多层次的调节，因此痛觉具有一定的可塑性。那么，组织酸化是如何影响细胞兴奋性，而且H+能否和经典的神经递质一样参与了痛觉可 塑性呢？对该课题的研究不仅可以拓宽痛觉传递的细胞分子机理，而且也将为临床药物提供新的理论

陈建国 项目批准号 30570556 学科代码 C010601
项目名称 PICK1蛋白在酸敏感离子通道介导的神经元缺血性损伤中的作用
申请书摘要缺血所致的神经元损伤发生机制主要与细胞内钙超载有关，NMDA受体过度兴奋被认为是钙超载的原因。但临床上用NMDA受体拮抗剂治疗效果并不 理想这一事实提示NMDA受体以外的钙超载机制可能存在。最近的研究表明酸敏感离子通道（ASICs）由于在缺血所致pH下降时可被激活，且对Ca2+具 有通透性，被推断为独立的缺血性神经元损伤的介导因素。但现有资料仍不能解释为什么ASICs通道在缺血时对同样的pH下降反应增

冯学超 项目批准号 30770493 学科代码 C010402
项目名称 水通道蛋白AQP1在软骨成骨中的作用及机制
申请书摘要哺乳动物骨生长和骨伤修复主要是是通过软骨内化骨实现的，在软骨内骨化过程中，肥大软骨细胞的形成起着至关重要的作用，目前对肥大软骨细胞的形 成机理尚不明了。动物水通道蛋白是一族广泛表达于上皮、内皮及其他一些组织细胞膜上，选择性高效转运水分子的特异孔道。申请人近期对小鼠长骨垢端软骨水通 道蛋白的表达情况进行了系统研究，发现AQP1在新生小鼠垢端软骨细胞广泛表达。第二骨化中心形成后AQP1表达集中在肥大软骨细胞，并且在侵入到第二骨 化中心的的血管内皮细胞高表达；对AQP1敲除小鼠骨骼进行系统的测量和组织形态学分析，结果发现AQP1敲除小鼠长骨生长迟滞，第二骨化中心形成延迟， 清楚地表明AQP1敲除引起了骨发育障碍。本项目拟在前期工作的基础上，利用AQP1基因敲除小鼠模型，应用细胞生物学、分子生物学、组织学和免疫组织化 学等方法，对AQP1在软骨内化骨中的作用及其细胞和分子机制进行系统研究。

黄荷凤 项目批准号 30670789 学科代码 C010708
项目名称 Ca2+激活K+通道在人子宫内膜细胞的表达、功能及其在胚胎着床中的作用
申请书摘要人子宫内膜细胞离子通道的活动是细胞增殖分化和胚胎着床重要机制之一，研究离子通道与母胎对话建立的相互作用将成为着床机制研究新切入点。本项 目拟在我们新近发现子宫内膜细胞表达Ca2＋激活大电导K+通道并测到Ca2＋和膜电压依赖的K+电流的基础上，进一步研究Ca2＋激活K+通道 （Kca）各亚型（BKca、IKca、SKca）在子宫内膜细胞的表达和功能特性以及信号离子的调节机制。将利用分子生物学和电生理技术，确定月经周期 中子宫内膜细胞Kca通道表达和功能特性以及和体内性激素的关系；通过性激素体外刺激实验研究子宫内膜细胞经Kca通道介导的膜电流、细胞内Ca2+释放 和下游种植窗因子（上调/下调基因和功能蛋白）的变化；通过Kca亚型特异激动和抑制试验，建立子宫内膜着床模型研究Kca介导的信号离子传导在胚胎着床 过程中的调控作用。以完善和补充胚胎着床的理论体系，并为避孕机理和不孕症治疗提供依据。

王军 项目批准号 30670765 学科代码 C010701
项目名称 心肌细胞容积敏感性钾通道的特性与分子定位的研究
申请书摘要调节性细胞容积减小（RVD）是心肌细胞的重要生理功能。RVD功能异常与心肌细胞的缺血再灌注损伤、细胞凋亡与坏死及心律失常的发生密切相 关。但心肌细胞RVD过程的离子通道机制目前尚不清楚。为阐明参与心肌细胞RVD过程的容积敏感性钾离子通道的特性和分子定位，本研究拟采用膜片钳全细胞 和单通道记录，观察心肌细胞容积敏感性钾离子通道的电生理学和药理学特性及单通道活动的动力学特征，判断其所属的钾通道亚型；用RT-PCR方法确认该亚 型钾通道基因在心肌细胞的表达，为电生理学实验结果提供依据；克隆该容积敏感性钾通道的基因cDNA，并稳定转染NIH/3T3细胞，观察所表达通道的容 积敏感性和电生理学、药理学特性，并与心肌细胞固有容积敏感钾通道特性比较，以进一步确认其分子定位。本研究将为阐明心肌细胞RVD过程的离子通道机制、 进一步研究其细胞内信号转导过程和探讨其病理生理学意义提供重要的实验依据。

王明伟 项目批准号 30700188 学科代码 C03031702
项目名称 细胞凋亡PET/CT分子影像探针的实验研究
申请书摘要分子影像是近几年由生命科学、医学、化学和物理交叉而成的新兴学科，正在改进和提高我们现在对疾病的发生与发展机制的理解及其诊断和治疗方法。 细胞凋亡，即细胞程序性死亡，是一种特殊的细胞死亡形式，在生理学和病理学中都有非常重要的意义。比如，放疗和化疗导致肿瘤细胞死亡达到治疗的目的，主要 是由于放化疗诱导的肿瘤细胞凋亡引起的。利用分子影像学的先进技术PET/CT，研究肿瘤细胞凋亡的在线、实时和无损伤的体内检测和定量方法对于肿瘤的诊 断和疗效评价具有重要的临床意义。本项目利用放射性中间体[18F]SFB标记具有我国独立知识产权的膜联蛋白B1（Annexin B1），研制新的细胞凋亡的分子显像剂[18F]SFB- Annexin B1，开展相关的放射化学合成、体内外肿瘤细胞和动物的凋亡模型的生物学性质和PET/CT显像研究，评价其作为肿瘤细胞凋亡的分子显像剂的可行性，有益 于临床肿瘤的个性化诊断和治疗。
申请书主题词 分子影像；细胞调亡；[18F]SFB- Annexin B1；PET/CT；肿瘤

李云春 项目批准号 30770604 学科代码 C03031702
项目名称 放射性核素标记单纯疱疹病毒1型突变体HSV1GRT在癌细胞的表达及其治疗恶性肿瘤的基础研究
申请书摘要 构建删除ICP34.5基因的一个拷贝和ICP47基因、并在UL39基因中插入E.coli lacZ基因、以及表达重组人TNFα基因的单纯疱疹病毒1型（HSV-1）突变体HSV1GRT。研制I-131-HSV1GRT、Re-188- HSV1GRT和Re-188-DTPA-HSV1GRT。研究突变体病毒HSV1GRT及其标记物（I-131-HSV1GRT、Re-188- HSV1GRT和Re-188-DTPA-HSV1GRT）在癌细胞中的表达及其抑制或杀伤