J Hematol Oncol：适配器CAR-T细胞精准靶向CD276，为小细胞肺癌带来新疗法突破

小细胞肺癌（SCLC）约占肺癌的15%，具有高侵袭性和高转移性，患者总体生存率极低，近三十年来治疗进展有限。虽然非小细胞肺癌（NSCLC）因免疫检查点阻断（ICB）等精准疗法取得显著进步，但SCLC依然缺乏有效的新疗法。现行的铂类化疗和放疗虽初期有效，但患者极易复发，中位生存期仅约7个月。SCLC基因组特征复杂，主要以TP53及RB1抑癌基因失活为特征，且呈现4大转录亚型（SCLC-A、N、P、Y），提示不同亚型可能存在不同治疗靶点。

CAR-T作为免疫细胞疗法，在血液肿瘤中已获得重大突破，但在实体瘤治疗中面临T细胞耗竭、肿瘤异质性和肿瘤微环境免疫抑制等多重挑战。近期，发表在Journal of Hematology & Oncology杂志的一项研究，旨在解决SCLC治疗中持续存在的生存率低和抗肿瘤效果不佳的问题。研究团队开发了基于可调适配器的AdCAR平台，利用适配器分子控制CAR-T靶向，从而实现多重、灵活、可控的肿瘤抗原识别及杀伤。

研究结果

1. CD276在SCLC中高表达，成为理想靶点

利用RNA测序数据分析79例SCLC初治患者样本，研究发现CD276的基因表达显著高于临床已评估的重要靶点DLL3（图1A）。进一步分析不同转录亚型细胞系（SCLC-A、N、P、Y），CD276表达均匀且普遍高于DLL3（图1B）。流式细胞术检测多条SCLC细胞系表面CD276蛋白，结果显示其均具有较高的阳性率（图1C）。免疫组化分析39例SCLC原发肿瘤样本显示，超过70%样本CD276表达强度评分处于最高级别(图1D-F)，证实CD276为SCLC广泛、均一表达的靶点。

图1 cd276在SCLC原发性患者样本中表达高

2. 直接CD276-CAR-T细胞表现出激活诱导性CD276表达并导致自我攻击，限制了扩增与活性

设计了包含CD28、4-1BB及CD3ζ共刺激信号的第三代CD276靶向直接CAR-T（dCAR-T）和基于适配器分子模式的AdCAR-T。针对dCAR-T，团队观察到其体外扩增受限，细胞数量远低于AdCAR-T及未转染T细胞（图2B）。激活状态的T细胞（包括dCAR-T，AdCAR-T及未转染T）均可诱导表达CD276，CD4+激活细胞中表达更高（图2C-D）。CD276表达受到不同刺激（CD3/CD28、IL-7/IL-15及重复进入CAR信号激活）的诱导（图2E-F）。通过辅以CD276针对性抗体或Fab片段，AdCAR-T表现出显著的活化和死亡，支持自我攻击（fratricide）假设（图2G-H）。因此，CD276介导的自体杀伤是限制dCAR-T制造和应用的关键瓶颈。

图2 活化的 CAR-T 细胞上 CD276 的上调会导致体外细胞数量减少和自相残杀

3. Fab基适配分子有效介导AdCAR-T杀伤CD276阳性SCLC细胞

为避免dCAR-T扩增受限的问题，团队运用人源化scFv噬菌体文库筛选出五个高亲和力CD276特异性Fab片段（AM分子）。在体外检测中，五种AM均能以皮摩尔量级（EC50 27-41 pM）诱导AdCAR-T对CD276阳性SCLC细胞和其他肿瘤细胞株强效杀伤（图3B-D）。其中AM46在重复杀伤实验中表现最优（图3E）。Fab片段短半衰期特性，使得适配器剂量调控成为可能，从而避免持续自体杀伤，延长CAR-T活性。

图3 新型生物素化抗 CD276 抗体 - 药物偶联物（AM）在体外通过 AdCAR-T 介导有效的肿瘤细胞清除

4. AdCAR-T结合AM实现体内CD276阳性SCLC肿瘤缓解与控制

在小鼠静脉注射SCLC細胞所建立的侵袭性肺部肿瘤模型中，30×10^6个AdCAR-T细胞联合每日注射100µg AM46显著抑制肿瘤进展，表现出良好肿瘤缓解，而无适配器或AdCAR-T单用均无显效，dCAR-T早期虽缓解肿瘤但逐渐失控且细胞数量快速下降(图4B-F)。适配器暂停后，肿瘤易复发，重新给药后AdCAR-T表现出良好复苏能力，证实其功能持续性优于dCAR-T。

图4 AdCAR-T 能在体内有效控制小细胞肺癌（SCLC）的疾病进展

5. 优化适配器给药方案提升AdCAR-T功能持久性

在“压力测试”模型中，比较每日给药、两天用两天停和四天用三天停3种用药方案。每日给药虽控制肿瘤效果最佳，但两天用两天停组在轻度刺激下，T细胞表现出更丰富的中心记忆型（TCM）及功能恢复（图5G-J）。数据表明针对不同病程阶段，合理调节适配器剂量方案能平衡即刻抗肿瘤杀伤和T细胞耐久性。

图5 给药方案可在再次激发免疫反应后促进 T 细胞扩增，而每日给药则展现出高效的抗肿瘤效果

6. 通过AdCAR-T诱导分泌IL-18，增强体内抗瘤性能和T细胞扩增

将人IL-18基因置于NFAT诱导启动子下并与AdCAR共同表达，设计第四代AdCAR_IL-18-T细胞。该细胞在激活时特异性分泌IL-18，显著增强T细胞生存、扩增及抗瘤活性（图6A-I）。体内模型重度复发后观察到AdCAR_IL-18-T组肿瘤显著缩小，血液中CD4/CD8比例趋于平衡，TCM及TEM丰富，提示IL-18表达改善了免疫微环境及CAR-T效能。

图6 装载 IL-18 的 AdCAR-T 细胞可增强中央记忆性 T 细胞（TCM）的分化、细胞扩增及抗肿瘤效果

研究价值与意义

本研究系统解析了CD276作为SCLC革新治疗靶点的潜力，突破了传统靶向CAR-T的自体攻击限制。通过模块化适配器平台，实现了灵活可控的免疫治疗，兼顾了T细胞的活化与功能持久性。IL-18的激活诱导型内源分泌为增强CAR-T持久抗瘤性提供了新思路。结合临床上SCLC现有治疗无法满足患者复发风险控制的现状，本研究提供了一种精准且具可调性的免疫治疗策略，预示着对SCLC及其他实体瘤CAR-T治疗的潜在促进作用。该方法不仅降低了潜在的CAR-T细胞耗竭和治疗副作用风险，也为今后个体化免疫疗法的设计铺平道路。

原始出处

Kristmann B, Werchau N, Suresh L, et al. Targeting CD276 with Adapter-CAR T-cells provides a novel therapeutic strategy in small cell lung cancer and prevents CD276-dependent fratricide. J Hematol Oncol. 2025;18:76. doi:10.1186/s13045-025-01729-8