重磅头条！一味金银花，一碗“微生态导弹”——中医清热解毒古方升级纳米版，轻中度UC有望告别激素！

炎症性肠病（IBD）是一组以慢性、复发性肠道黏膜损伤为特征的免疫介导性疾病，包括溃疡性结肠炎（UC）和克罗恩病（CD）。全球患者已突破680万，且在中国、印度等新兴工业化国家呈爆发式增长，预计2025年将与欧美发病率持平。现行“糖皮质激素—免疫抑制剂—生物制剂”阶梯方案虽可短期控制活动期炎症，却面临疗效递减、机会感染、淋巴瘤风险及经济毒性等棘手难题。更为尴尬的是，即便进入生物制剂时代，仍有30%—40%患者在5—10年内需接受肠切除，提示单纯“免疫抑制”策略已触及天花板。

金银花自古被《本草纲目》列为“上品”，具有清热解毒、止痢消肿之功，现代药理学亦证实其有机酸、黄酮、环烯醚萜等组分可抑制NF-κB、NLRP3等经典炎症通路。然而，传统水煎剂口服后生物利用度低、有效成分易被胃酸破坏，限制了其在IBD领域的转化。2020年后，植物源性外泌体样纳米囊泡（PNVs）概念的兴起，让研究者意识到草本本身亦能分泌100 nm级双层膜囊泡，其内装载miRNA、脂质、蛋白及次级代谢产物，可跨物种递送并调控宿主基因表达。

受此启发，浙江人民医院康复医学中心与北化大生物材料团队联合攻关，首次从金银花汁液中分离纯化出均一纳米囊泡（HNVs），并在DSS诱导的急性结肠炎模型中系统验证其“菌—代—免”三维调控效应，结果发表于2025年《Advanced Science》。本文基于该文数据，结合中医“整体观”“扶正祛邪”理论，为临床同道深度解读HNVs的科学内涵与转化前景。

图1 论文首图

金银花草本纳米囊泡的分离与表征 

研究遵循“鲜草榨汁—差速离心—切向流超滤”三步标准化流程：取100 g干品金银花，PBS复水2 h后高速匀浆，依次去除残渣与微粒，最终经150 000×g超离及200 nm中空纤维柱浓缩，每克干品可收获约7.4×10¹¹颗粒，蛋白浓度19.7 mg·mL⁻¹，得率较传统水煎法提升两个数量级。冷冻透射电镜显示囊泡呈椭圆形，粒径77±19.6 nm，Zeta电位−8.13 mV，在模拟胃液与肠液中8 h内粒径分布无显著漂移，提示其可安全通过上消化道并抵达结肠靶段。非靶向脂质组学揭示甘油三酯占63.8%，其次为二酰甘油与神经酰胺；碳链长度以C36、C54为主，不饱和度集中在2–4个双键，与哺乳动物外泌体脂质谱高度相似，预示其易被肠上皮识别摄取。miRNA-seq共检出2932条成熟miRNA，丰度最高为PC-5p-23_116203（37.56%），生物信息学预测其靶基因富集于TNF、IL-23及JAK-STAT通路，为后续抗炎效应埋下伏笔。整体而言，HNVs具备“粒径小、负电荷、膜亲和、miRNA富集”四大特征，为口服后跨上皮转运并调控宿主细胞奠定物质基础。

图2 金银花草本纳米囊泡的分离与表征

HNVs 在 DSS 诱导的 IBD 小鼠模型中的治疗效果

实验采用C57BL/6雄鼠，2.5% DSS自由饮用7 d后随机分为空白、模型、5-ASA阳性及HNVs低、高剂量组，灌胃治疗10 d。高剂量组（20 g·kg⁻¹·d⁻¹）第3天即显著抑制体重下降，第10天DAI评分由模型组9.2降至2.1，结肠长度缩短率减少58%，脾指数下降42%，组织学损伤评分由11.4降至3.8，疗效优于100 mg·kg⁻¹ 5-ASA组，且低剂量组亦呈剂量依赖优势。尤为惊喜的是，HNVs治疗组镜下几乎未见透壁溃疡及隐窝脓肿，黏膜肌层完整，提示其对活动期炎症兼具“治标”与“治本”双重效应。安全性方面，连续8 d给予健康鼠双倍剂量HNVs，肝肾功能、外周血象及主要脏器组织学无异常，IVIS成像显示HNVs仅在炎症结肠富集，正常肠段及心、肺分布极低，证实其“炎症趋化”特性与极佳生物相容性。

图3 HNVs 在 DSS 诱导的 IBD 小鼠模型中的治疗效果

HNVs 减轻 DSS 诱导小鼠的黏膜免疫细胞浸润与炎症

免疫组化显示，模型组CD3⁺、CD8⁺及MPO⁺细胞密集浸润至黏膜下层，而HNVs高剂量组三种阳性细胞分别下降68%、61%与55%，同时M2型巨噬细胞标记CD163增加2.3倍，提示其可促进巨噬细胞由M1向M2极化。血清ELISA进一步验证：TNF-α、IL-6、IFN-γ、MCP-1分别下调64%、58%、52%与49%，而抑炎因子IL-10升高3.1倍。中医谓“热毒炽盛则肉腐成脓”，HNVs通过“清热解毒”抑制炎性细胞趋化，同时“托毒生肌”促进M2巨噬细胞修复，正合“扶正祛邪”之旨。

图4 HNVs 减轻 DSS 诱导小鼠的黏膜免疫细胞浸润与炎症

HNVs 保护 DSS 诱导小鼠的结肠黏膜屏障功能 

IBD反复发作的关键在于“黏膜屏障”失守，相当于中医“藩篱不固，外邪乃入”。实验发现，模型组紧密连接蛋白Occludin、ZO-1表达量仅为正常30%，杯状细胞数目减少70%，而HNVs治疗后上述指标恢复至正常水平的90%以上，Ki67⁺增殖细胞增加2.6倍，PAS染色显示黏液层厚度提升1.8倍。FITC-葡聚糖肠道渗漏实验亦证实，HNVs组血清荧光强度下降57%，提示其可“健脾涩肠”，重建物理—化学—免疫三重屏障。

图5 HNVs 保护 DSS 诱导小鼠的结肠黏膜屏障功能

HNVs 调节 DSS 诱导小鼠的肠道微生物群

16S rRNA测序显示，模型组α多样性下降，Proteobacteria、弯曲菌门及Deferribacteres显著扩张，Firmicutes/Bacteroidetes比值由4.2跌至0.9；HNVs干预后，该比值回升至3.8，且有益菌Eubacterium、Turicibacter、Prevotellaceae_UCG-001丰度增加，致病菌Escherichia-Shigella、Helicobacter、Akkermansia下降。LEfSe分析提示，HNVs组特征菌为Turicibacter，模型组为Escherichia-Shigella，两者呈显著负相关。PICRUSt2功能预测表明，HNVs可上调脂肪酸代谢、丁酸合成及胆酸降解通路，提示其“调菌”并非简单“补菌”，而是通过重塑菌群代谢网络，恢复“脾胃运化”之职。

图6 HNVs 调节 DSS 诱导小鼠的肠道微生物群

HNVs 影响 DSS 诱导结肠炎小鼠的肠道代谢产物

靶向代谢组显示，HNVs组盲肠内容物乙酸、丁酸浓度分别提升2.1与2.7倍，而促炎型脱氢胆酸（DBH）下降46%，保护型23-去氧胆酸（NorDCA）升高63%。中医强调“六腑以通为用”，短链脂肪酸（SCFA）浓度升高既可增强上皮能量，又可诱导Treg分化；胆酸代谢由“毒”向“护”转换，则体现“化毒为和”的中医解毒思路。Spearman相关性分析提示，丁酸水平与Turicibacter丰度呈正相关（r=0.82），与IL-6呈负相关（r=−0.79），进一步将“菌—代—炎”锁定为因果链。

图7 HNVs 影响 DSS 诱导结肠炎小鼠的肠道代谢产物

转录组解析 HNVs 在 DSS 诱导小鼠中的治疗机制

RNA-seq差异分析显示，HNVs逆转了模型组208个上调、610个下调的基因表达，其中40个核心差异基因富集于“神经活性配体—受体相互作用”“趋化因子信号”“cAMP信号”三条通路。GSEA分析揭示，HNVs显著抑制趋化因子轴（NES=−1.86，P=0.0036），下调CXCL1、CXCL2、CCL20等趋化因子，减少中性粒及Th17募集；同时下调cAMP-PKA轴，提示其可阻断炎症放大环路，恢复“阴阳自和”。KEGG疾病模块显示，HNVs对“Ⅰ型糖尿病”“金黄色葡萄球菌感染”等自身免疫与感染通路同步下调，预示其具有跨病种免疫稳态调节潜能。

图8 转录组解析 HNVs 在 DSS 诱导小鼠中的治疗机制

HNVs 重新平衡 DSS 诱导小鼠的 CD25+Foxp3+ Treg 与 IL-17+CD4+ T 细胞应答

流式细胞术显示，HNVs组脾脏CD25⁺Foxp3⁺ Treg比例由4.1%升至9.8%，而IL-17⁺CD4⁺ Th17由13.9%降至0.8%，IFN-γ⁺ Th1亦同步下降；结肠组织Foxp3荧光强度提高3.3倍，IL-17阳性面积减少87%。RNA-seq GSEA证实IL-17信号通路被显著抑制（NES=−0.33，P=0.036）。中医谓“正气存内，邪不可干”，Treg/Th17再平衡正是“扶正”以“祛邪”的现代注脚，也说明HNVs可通过“补土伏火”重建肠道免疫耐受。

图9 HNVs 重新平衡 DSS 诱导小鼠的 CD25+Foxp3+ Treg 与 IL-17+CD4+ T 细胞应答

在肠道菌群耗竭的 DSS 诱导小鼠中，HNVs 无法缓解结肠炎症状 

为验证“菌依赖性”，团队予广谱抗生素鸡尾酒（氨苄+万古+甲硝唑+新霉素）5日清除99.9%肠道菌，再行DSS造模并予HNVs。结果体重、DAI、结肠长度及组织学评分与模型组无差异，证实HNVs抗炎效应必须依赖“菌中介”。进一步行菌群人源化：将HNVs治疗鼠粪菌移植至无菌背景鼠，可重现90%疗效；而热灭活菌悬液组反而比活菌组表现更优，提示“菌结构+代谢产物”而非活菌本身才是起效核心。中医“脾为后天之本，气血生化之源”，若“菌土”被伐，则“万物不生”；该实验为临床联合抗生素或粪菌移植提供了警示：滥用抗菌药可能“破气伤脾”，削弱草本纳米制剂的疗效。

图10 在肠道菌群耗竭的 DSS 诱导小鼠中，HNVs 无法缓解结肠炎症状

小结

金银花源性纳米囊泡以“天然来源、口服便捷、多维调控、安全无毒”四大优势，为IBD治疗提供了一条“调菌—调代谢—调免疫”的中医整体观新路径。未来需进一步明确：①高丰度miRNA的靶基因谱与量效关系；②菌群体外发酵与HNVs互作的“双向对话”机制；③不同证型（大肠湿热、脾虚湿蕴、寒热错杂）患者对HNVs的应答差异，以精准定位优势人群。可以预见，随着“草本外泌体”研究热潮的兴起，中医药“君臣佐使”不再局限于复方配伍，而是进入“纳米级精准递送”时代；HNVs或将成为连接传统“清热解毒”与现代“微生态医学”的桥梁，为后生物制剂时代IBD治疗贡献中国方案。

参考文献：

Wang Y, Zhou Y, Wu Q, Li Y, Huang Y, Yu K, Li P, Lv Z, Liu H, Zou H, Liu H, Mou X. Honeysuckle-Derived Nanovesicles Regulate Gut Microbiota for the Treatment of Inflammatory Bowel Disease. Adv Sci (Weinh). 2025 Dec;12(45):e05208. doi: 10.1002/advs.202505208. Epub 2025 Sep 19. PMID: 40971731; PMCID: PMC12677632.