J Periodontal Res:尿激酶-纤溶酶原激活剂对牙周膜成纤维细胞氧化诱导凋亡和DNA损伤的保护作用
2018-10-01 MedSci MedSci原创
尿激酶 - 纤溶酶原激活物(uPA)是在正常龈沟液中高基础水平表达的丝氨酸蛋白酶。尽管在牙周炎中的组织蛋白水解中已知其病理学作用,但关于口腔组织中的uPA生理功能知之甚少。癌细胞中的最新证据表明uPA系统在DNA修复和抗凋亡途径中。本研究旨在评价尿激酶对牙周膜(PDL)成纤维细胞氧化性DNA损伤的保护作用,提出了口腔内uPA新的生物学作用。
尿激酶 - 纤溶酶原激活物(uPA)是在正常龈沟液中高基础水平表达的丝氨酸蛋白酶。尽管在牙周炎中的组织蛋白水解中已知其病理学作用,但关于口腔组织中的uPA生理功能知之甚少。癌细胞中的最新证据表明uPA系统在DNA修复和抗凋亡途径中。本研究旨在评价尿激酶对牙周膜(PDL)成纤维细胞氧化性DNA损伤的保护作用,提出了口腔内uPA新的生物学作用。
方法:从健康人智齿中分离PDL细胞。建立氧化应激模型,其中将PDL细胞与20,30,40和60μmol/ L过氧化氢一起温育。在过氧化物处理前后二十四小时,用uPA和阿米洛利处理细胞。通过3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基溴化四唑测定法评估细胞活力,通过DAPI染色和膜联蛋白V /碘化丙啶测定法测定细胞凋亡,并通过碱性彗星测定法测定DNA断裂。为了估计DNA损伤水平,使用流式细胞术和免疫染色研究γ-H2AX表达。
结果:用uPA孵育过氧化物处理的细胞显着增加细胞活力并减少细胞凋亡。在uPA处理的细胞中,30μmol/ L过氧化氢处理的γ-H2AX灶的数量显着减少。由阿米洛利治疗引起的uPA抑制反过来诱导细胞活力的降低。此外,彗星试验发现uPA处理组中DNA损伤水平显着降低。
本研究支持uPA可能对牙周组织起保护作用的理论,保护PDL成纤维细胞免受氧化性DNA损伤和凋亡。
原始出处:
M. S. Ahmad Akhoundi, et al.Urokinase‐plasminogen activator protects periodontal ligament fibroblast from oxidative induced‐apoptosis and DNA damage. Journal of Periodontal Research. 2018 October. Doi:10.1111/jre.12576
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