Front Immunol：PEG-IFN a-2a治疗期间HBeAg阳性患者浆细胞样树突状细胞功能分子表达与HBsAg丢失相关

背景：大约有2 . 5-3亿人慢性感染HBV病毒。慢性乙型肝炎(CHB)仍然是一个重要的世界性公共卫生问题，长期慢性感染可导致肝硬化、肝衰竭和肝细胞癌。迫切需要探索慢性乙型肝炎的最佳治疗策略。此外，抗病毒治疗是减缓慢性乙型肝炎进程的最有效的治疗方法。目前，“功能性治愈”的定义是，无论血清中是否有HBsAg血清转化，都是慢性乙型肝炎抗病毒治疗的终点。在慢性HBV感染的自然过程中，HBsAg的丢失每年只有1.15%。几项研究表明，cccDNA的降解或永久失活有助于实现CHB的“功能性治愈”。在目前的抗病毒治疗中，聚乙二醇干扰素α-2a(PEG IFN a-2a)作为一线抗病毒药物，具有直接的抗病毒和免疫调节活性(。PEG-IFN-a治疗慢性乙型肝炎可使约10%-30%的患者在一定时间内出现HBeAg清除、HBsAg丢失甚至HBsAg血清转化。

除了直接的抗病毒活性，IFN-a的免疫调节作用可能最终诱导对乙型肝炎感染的免疫控制。作为早期抗病毒先天免疫反应的重要组成部分，浆细胞样树突状细胞(pDCs)是体内响应病毒感染产生IFN-α的主要效应细胞。在慢性HBV感染中，pDCs的功能明显受到乙型肝炎病毒学的损害。HBsAg阻断TLR9诱导的IRF7磷酸化信号通路，导致pDCs表面IFN-a生成减少和共刺激分子(如CD80、CD86、CD83)表达受损。Martinet等人已经证明，对Toll样受体9配体(TLR9-L)刺激有缺陷反应的pDCs不会在乙型肝炎患者中诱导NK细胞的溶细胞活性。其他研究表明，作为一种免疫耐受蛋白，HBeAg可以促进树突状细胞分化为调节性树突状细胞(DCregs ),其可以诱导幼稚T细胞分化为Tregs，以损害病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应。因此，pDCs功能障碍可能是乙型肝炎持续感染的重要原因。基于pDCs的主动免疫治疗可能成为治疗CHB的一种有前景的方法。

先前的研究表明，PEG-IFN-a可以在慢性乙型肝炎的早期激活pDCs。这些研究阐明了干扰素治疗慢性乙型肝炎过程中免疫细胞功能的变化，但对聚乙二醇干扰素治疗后功能治愈的慢性乙型肝炎患者中pDCs的频率和功能变化知之甚少。

目的:慢性乙型肝炎抗病毒治疗的理想终点是清除乙肝表面抗原。本研究旨在评估在聚乙二醇干扰素α-2a(PEG IFN a-2a)治疗期间，类浆细胞树突状细胞(pDCs)功能分子的表达是否与HBeAg阳性患者的HBsAg丢失相关。

方法:对接受PEG-IFN a-2a治疗的HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者进行单中心前瞻性队列研究，并随访4年。通过PEG-IFN a-2a治疗实现的HBsAg清除、HBeAg丢失和HBV DNA检测不到被认为是功能性治愈。在开始治疗时，治疗12周和24周后，测量外周血中pDC和CD86+ pDC的频率，以及pDC表面CD86的平均荧光强度。

结果:在登记的63名患者中，17名患者HBsAg丢失。非功能性治愈组的基线HBV DNA载量显著高于功能性治愈组，而非功能性治愈患者的CD86+ pDC%显著低于功能性治愈组。HBV DNA载量(OR=0.146，P = 0.002)和CD86+ pDC% (OR=1.183，P = 0.025)是二元logistic回归分析证实的与功能性治愈相关的独立因素。在功能性治愈组中，与基线相比，治疗12周和24周后，HBsAg、HBeAg和HBV DNA载量显著下降。在无功能治愈组，治疗12周后，CD86+ pDC%和CD86MFI较基线显著增加。在功能性治愈组，与基线相比，pDC%在24周时显著增加，而CD86MFI在治疗24周后显著增加。

图1 |通过FlowJo软件分析外周血pDCs的频率和共刺激分子CD86的表达。(A)根据前向散射和侧向散射描绘外周血单核细胞。(B，C)PDC是基于单核细胞中的抗人类HLA-DR、抗人类谱系鸡尾酒和抗人类CD123来描绘的。(D)CD86+pDCs的描述基于pDCs中的CD86-PE标记。HLA-DR+ CD123+谱系细胞被定义为pDCs。外周血单核细胞中的pDC比例定义为pDC频率(pDC%)。表面表达共刺激分子CD86的pDCs被定义为CD86+ pDCs。pDCs中CD86+ pDC的比例定义为CD86+ pDC频率(CD86+ pDC%)。pDCs的定量包括pDCs和CD86+ pDCs的频率以及CD86的平均荧光强度(CD86MFI)。

表1 两组间的基线pDC频率和共刺激分子CD86的表达。

图2 | pDC频率或功能(pDC%、CD86+ pDC%和CD86MFI)与血清学和病毒学指标(HBsAg、HBeAg和HBV DNA、ALT)之间的相关性。(A–C)pDC频率或功能[pD% (A)、CD86+ pDC% (B)和CD86MFI (C)]与HBsAg之间的相关性。(D–F)pDC频率或功能[pDC% (D)、CD86+ pDC% (E和CD86MFI (F)]与HBeAg之间的相关性。(G–I)pDC频率或功能[pDC% (G)，CD86+ pDC% (H)和CD86MFI (I)]与HBV DNA之间的相关性。(J–L)pDC频率或功能[pDC% (J)、CD86+ pDC% (K)和CD86MFI (L)]与ALT之间的相关性。

图3 |功能性治愈组和非功能性治愈组在基线和PEG-IFN-a-2a治疗12周和24周后的pDC% (A)、CD86+ pDC% (B)和CD86MFI (C)的比较。

图4 |功能性治愈组和非功能性治愈组在基线时以及治疗12周和24周后的pDC频率和功能趋势，包括pDC%、CD86+ pDC%和CD86MFI。(A–C)非功能性治愈组基线时以及治疗12周和24周后pDC% (A)、CD86+ pDC% (B)和CD86MFI (C)的趋势。功能性治愈组在基线时以及治疗12周和24周后pDC% (D)、CD86+ pDC% (E)和CD86MFI (F)的趋势。校正水平a设定为0.016，P < 0.016被认为具有统计学意义。

结论:基线HBV DNA载量越低，基线CD86+ pDC%越多，患者越容易获得功能性治愈。

原文出处：  Cao W,  Xie S,  Zhang L, et al.Expression of Functional Molecule on Plasmacytoid Dendritic Cells Is Associated With HBsAg Loss in HBeAg-Positive Patients During PEG-IFN α-2a Treatment.Front Immunol 2022;13