项目简介
项目名称
乙型肝炎preS/S转基因番茄口服疫苗实验研究
项目批准号
30170532
学科分类
C0606
生命科学部
_遗传学与生物信息学
_基因表达调控与表观遗传学
资助类型
生命科学
负责人
黄建生
依托单位
南方医科大学
批准年份
2001
起止时间
200201-200412
批准金额
17.00万元
摘要
首先设计并合成乙肝病毒多表位复合基因，再与HBc脊区基因连接构建以ＨＢｃ颗粒为呈现载体的ＨＢＶ多表位复合基因真核表达载体ｐＨＢｃ Ｍｅｐ，经大肠杆菌表达、DNA免疫、转染NS-1骨髓瘤细胞及肝癌细胞等鉴定，表达蛋白正确，具有抗原性，并能诱导一定的体液免疫和细胞免疫反应。
接着将目的基因克隆入植物表达载体pBIN438(含35s启动子)中，通过液氮冻融法转化根瘤农杆菌eha105，采用叶盘法转化番茄，获得一批转基因番茄植株，经PCR、PCR-Southern blot和Southern blot证实目的基因已整合到了番茄基因组中。经Western blot证实目的基因能够在番茄中有效表达，成功构建了乙肝病毒复合抗原的转基因番茄植株。后对转基因番茄进行了口服和皮下注射两种途径的小鼠免疫试验，结果未检测到特异性抗体及抗原，可能与番茄的抗原表达量较低有关。
该研究证实了转基因番茄的可行性，但如何提高表达量应该是一个关键因素。
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