用树体环剥技术快速分析油茶基因功能的方法研究

负责人:胡孝义

依托单位:安徽农业大学

批准年份:2010

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项目简介
项目名称
用树体环剥技术快速分析油茶基因功能的方法研究
项目批准号
31070605
学科分类
C161101 生命科学部 _林学 _经济林学 _经济林重要性状形成及调控
资助类型
生命科学
负责人
胡孝义
依托单位
安徽农业大学
批准年份
2010
起止时间
201101-201312
批准金额
36.00万元
摘要
根据砧木RNA沉默源的沉默信号可在植物体内长距离传导的原理,视油茶树干环剥面为外植体,直接在野外模拟植物转基因流程,环剥面生成的愈伤组织转基因细胞群作为"主"沉默源;根据病毒自发的系统侵染特点,将病毒载体工程菌液注射于环剥口作为"辅助"沉默源。此二沉默源的沉默信号传导至油茶树体上部沉默靶基因,从而可研究基因的功能。以PDS为标记基因,根据嫩叶漂白表型的程度及靶mRNA相对含量来检验RNA沉默效果和优化各处理参数;在单基因的沉默方法优化基础上研究多基因联合沉默的方法。本课题所创方法体系不需知晓靶基因全长cDNA、也不需获得转基因植株,就可快速、较直观地反映基因的功能表型,流程简单,周期短,研究成本低廉;不仅适用于单基因的功能研究,也可应用于多基因的功能分析,还将能直接应用于油茶的分子改良。
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