项目简介
项目名称
拟南芥黄嘌呤氧化酶基因的克隆、鉴定及其在胁迫条件下的表达
项目批准号
30270138
学科分类
C020407
生命科学部
_植物学
_植物生理学
_植物生长调节物质
资助类型
生命科学
负责人
夏凯
依托单位
南京农业大学
批准年份
2002
起止时间
200301-200512
批准金额
20.00万元
摘要
黄嘌呤氧化酶(XO)催化次黄嘌呤转化为黄嘌呤,以及黄嘌呤形成尿素。由于XO以O2为电子受体,其催化反应导致活性氧分子（ROS）的形成。因此，XO可能是细胞受ROS伤害的关键酶之一。本项目拟克隆拟南芥的XO基因，以大肠杆菌表达系统鉴定该基因表达产物的酶活性；分析XO基因表达的诱导因子；并进一步利用XO缺失型突变体和XO专一性抑制剂对比研究XO在胁迫条件下的表达情况。首先对拟南芥的XO基因进行了克隆,分别命名为基因At-XO1和At-XO2。用E. Coli.表达系统表达出At-XO1 cDNA融合蛋白，证实该融合蛋白具有氧化次黄嘌呤的性质。分析了拟南芥中XO基因表达的调控，发现在脱水、盐、和脱落酸处理诱导该基因快速表达。低温、机械伤害、盐胁迫、渗透胁迫、以及ABA和MeJA等也可诱导酶蛋白快速生成。抑制剂和突变体的实验说明，黄嘌呤氧化酶对非生物胁迫下H2O2的生成具有一定的贡献，并参与了非生物胁迫对植物的伤害过程。
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