研究氯喹/羟氯喹与其单一对映异构体和血管紧张素转换酶2之间的相互作用

氯喹（CQ）和羟氯喹（HCQ）是众所周知的抗疟药，后来发现它们还具有免疫调节和抗炎作用，广泛用于治疗风湿性疾病，如类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮。早在1983年就有CQ抑制甲型和乙型流感病毒的报道，后来发现CQ对体外人类免疫缺陷病毒（HIV）和SARS冠状病毒的复制有抑制作用。作为潜在的广谱抗病毒药物，CQ和HCQ的使用在SARS-CoV-2的暴发中受到广泛关注。

对映异构体分离羟氯喹（HCQ）并将每种对映异构体保留在血管紧张素转换酶2（ACE2）-HEK293T/细胞膜色谱（CMC）柱上：

自SARS-CoV-2爆发的早期临床治疗以来，一直在研究氯喹和羟氯喹。考虑到目前这两种手性药物作为外消旋体，建立了高表达血管紧张素转换酶2细胞膜色谱法，用于研究两种配对对映异构体与血管紧张素转换酶2受体结合的差异。还进行了分子对接测定和SARS-CoV-2刺突假型病毒进入血管紧张素转换酶2-HEK293T细胞的检测，以进行进一步研究。此研究建立了2D LC系统来分离CQ/HCQ的对映异构体，并评估单个对映异构体是否与ACE2受体相互作用。ACE2-HEK293T CMC用于评估作用于ACE2受体的对映异构体的结合亲和力。结果表明，每个对映体都能与血管紧张素转换酶2结合良好，但在正面分析中，配对对映体与相应的外消旋体之间存在差异。与S-氯喹/氯喹（外消旋体）相比，R-氯喹表现出更好的血管紧张素转换酶2受体结合能力。S-羟氯喹表现出比R-羟氯喹/羟氯喹更好的血管紧张素转换酶2受体结合能力。此外，与对照组相比，每种对映异构体都被证明是有效的；与S-氯喹或外消旋体相比，R-氯喹在相同浓度下表现出更好的抑制效果。至于羟氯喹，R-羟氯喹表现出比S-羟氯喹更好的抑制效果，但比外消旋体略差。

两种配对对映异构体与血管紧张素转换酶 2 （ACE2） 的分子对接模型：

综上所述，四种药物均能与ACE2受体相互作用，显示出阻止病毒与ACE2受体结合的潜在活性，SARS-CoV-2刺突假型病毒进入的检测验证了其能力。ACE2-HEK293T/CMC是筛选潜在活性成分的可靠方法。同时，在相同浓度下，R-CQ表现出比S-CQ和CQ外消旋体更好的抑制效果，两种对映异构体间差异显著。在相同浓度下，S-HCQ与ACE2受体的结合能力优于R-HCQ/HCQ（外消旋体），而阻止SARS-CoV-2假病毒进入细胞的效果弱于相同浓度下的R-HCQ/HCQ（外消旋体）。

氯喹 （CQ）/羟氯喹 （HCQ） 的单一对映异构体与血管紧张素转换酶 2 （ACE2） 受体相互作用参数：

在此研究中，研究者建立了一个二维LC系统，这将是分离对映异构体并评估单个对映异构体是否与ACE2受体相互作用的快速便捷方法。同时，利用CMC同时评价作用于ACE2受体的对映异构体的结合亲和力。解离平衡常数（K _D）的每种对映异构体与ACE2受体首次进行比较。此外，首先研究和比较了两种配对对映异构体阻止SARS-CoV-2刺突假型病毒进入细胞的能力差异。这项研究为使用CQ/HCQ的单一对映异构体进行SARS-CoV-2治疗提供了新的见解。

参考文献：Jia Q, Fu J, Liang P, Wang S, Wang Y, Zhang X, Zhou H, Zhang L, Lv Y, Han S. Investigating interactions between chloroquine/hydroxychloroquine and their single enantiomers and angiotensin-converting enzyme 2 by a cell membrane chromatography method. J Sep Sci. 2022 Jan;45(2):456-467. doi: 10.1002/jssc.202100570. Epub 2021 Nov 17. PMID: 34729910; PMCID: PMC8661882.