Phytomedicine：黄芪桂枝五物汤通过影响CD4+T细胞治疗MS

多发性硬化（MS）是一种中枢神经系统的炎性脱髓鞘疾病，主要损害脑白质而导致神经系统的功能紊乱，其发病机制尚不明晰，一般认为是由基因和环境等多种因素引起，值得一提的是，CD4+T细胞，它对MS的发生发展至关重要。

MS现有的西医成熟治疗方案，急性发作期首选大剂量甲泼尼龙的冲击治疗，缓解期则多采用疾病调节治疗（DMT），包括β-干扰素、醋酸格拉默、那他珠单抗等，但由于副作用较多，其在临床的使用颇为受限。

黄芪桂枝五物汤出自张仲景《金匮要略》，由黄芪、桂枝、芍药、生姜、大枣组成，具有调和营卫、益气温经、和血通痹的作用，临床上常用于治疗类风湿性关节炎、IgA肾病等自身免疫性疾病。此外，有研究表明，黄芪桂枝五物汤对于MS有较好的疗效，但作用机制尚未明确。

近日，上海中医药大学中药研究所题为“Huangqi-Guizhi-Wuwu decoction regulates differentiation of CD4+ T cell and prevents against experimental autoimmune encephalomyelitis progression in mice”的研究论文，被《Phytomedicine》杂志接收发表。研究者通过构建实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型（EAE）对黄芪桂枝五物汤治疗MS的机理进行探究，为临床治疗MS提供了理论和实验依据。

黄芪桂枝五物汤对MS有较好的疗效

EAE与MS在临床表现和病理上较为接近，因此被认为是研究MS发病机制和治疗策略的理想模型。研究者根据现有方法制备EAE动物模型，将结核分枝杆菌H37Ra加入不完全弗氏佐剂，配成完全弗氏佐剂。完全弗氏佐剂呈油状，再与PBS溶解的抗原充分混合成乳剂，皮下注射C57BL/6雌性小鼠。每只小鼠在免疫当天和48小时后均被注射250ng的百日咳毒素（PTX）。

同时，每天对小鼠EAE做评分记录：0-无疾病，1-尾部失张力，2-后肢瘫痪，3-后半身体瘫痪，4-四肢瘫痪，5-死亡。

模型制备后，将所有小鼠随机分为6组：空白对照组、EAE组、黄芪桂枝五物汤低剂量组、黄芪桂枝五物汤中剂量组、黄芪桂枝五物汤高剂量组和FTY-720组。分别给予等量蒸馏水、3.5g/kg黄芪桂枝五物汤、7g/kg黄芪桂枝五物汤、14g/kg黄芪桂枝五物汤和1mg/kg FTY-720灌胃，免疫后第21天处死。

结果显示，从第7天开始，与EAE组相比，黄芪桂枝五物汤治疗组和FTY-720治疗组的EAE评分明显降低。脊髓病理检查发现EAE组出现炎性反应和脱髓鞘，而黄芪桂枝五物汤治疗组的炎性反应和脱髓鞘明显减轻。这表明黄芪桂枝五物汤对MS有较好的疗效。

图1 黄芪桂枝五物汤改善EAE小鼠模型

黄芪桂枝五物汤治疗EAE模型小鼠机制初探

接着，研究者尝试构建蛋白质相互作用网络，寻找核心靶点，进而发现这些核心靶点主要涉及细胞因子信号转导与免疫调节，这提示免疫调节可能是黄芪桂枝五物汤治疗MS的主要作用机制。