APS：汉黄芩素通过靶向BCL -2介导的自噬和凋亡来保护肾小球足细胞。

糖尿病肾病(DKD)是糖尿病的微血管并发症之一，是终末期肾病的主要原因，治疗方法选择有限。汉黄芩素是从黄芩根中提取的黄酮类化合物，具有较强的肾脏保护作用。但DKD的作用机制尚未完全阐明。

方法：本研究采用小鼠足细胞克隆5 (MPC5)细胞和糖尿病小鼠模型，研究了汉黄芩素对肾小球足细胞的影响。用高糖(30 mM)处理MPC5细胞。

结果：汉黄芩素 (4,8,16 μ M)剂量依赖性地减轻了高糖(HG)诱导的MPC5细胞损伤，并伴有WT-1、nephrin和podocin蛋白表达增加，TNF-α、MCP-1、IL -1β和磷酸化P65表达减少。此外，汉黄芩素可显著抑制HG诱导的MPC5细胞凋亡。汉黄芩素逆转了HG抑制的MPC5细胞的自噬，证据是ATG7、LC3-II和Beclin-1蛋白升高，P62蛋白降低。我们证明了在MPC5细胞中汉黄芩素直接与Bcl-2结合。在HG处理的MPC5细胞中，下调Bcl-2可消除汉黄芩素的有益作用，而过表达Bcl-2可模拟汉黄芩素的保护作用。有趣的是，我们发现Bcl-2在糖尿病肾病患者肾活检组织中的表达显著降低。体内实验采用STZ诱导的糖尿病小鼠，每隔一天给药汉黄芩素(10、20、40 mg·kg ^{- 1}·d ^{- 1}, i.g)，连续12周。我们发现，给药汉黄芩素显著减轻蛋白尿、组织病理学病变和p65 NF-κ b介导的肾脏炎症反应。汉黄芩素剂量依赖性地抑制STZ诱导的糖尿病小鼠足细胞凋亡并促进足细胞自噬。

汉黄芩素对高糖处理MPC5细胞活力的影响及对高糖诱导炎症的抑制作用。a.汉黄芩素的分子式。b.采用MTT法检测对MPC5细胞和HG处理的MPC5细胞活力的影响。c.Western blot检测WT-1、nephrin和podocin在MPC5细胞中的表达。d.PCR检测MPC5细胞中TNF-α、MCP - 1、I L - 1β的表达。e.Western blot分析MPC5细胞中磷酸化的p65 (p-p65)。结果为三个独立实验的平均值±SEM。* P < 0。5、** p < 0.01， *** p <0.001 vs NC。# P < 0.5、## p <0.01，###P< 0.001 vs HG . HG高葡萄糖，MG5.5 mM葡萄糖加24.5 mM甘露醇，NCnormal对照组，Wog.汉黄芩素.

汉黄芩素促进HG诱导的自噬障碍。b Western blot分析MPC5细胞中beclin-1、ATG7、LC3和p62的表达。图示MPC5细胞自噬体透射电镜图像，箭头为自噬体。比例尺= 500nm。结果为三个独立实验的平均值±SEM。**P< 0.01， ***P< 0.001 vs NC。# # P < 0。1、### p <0。0 0 1 v sHG . HG高葡萄糖，MG5.5 mM葡萄糖加24.5 mM甘露醇，NCnormal对照组，Wog.汉黄芩素.

Bcl-2过表达和汉黄芩素具有类似的细胞保护作用。MPC5细胞中Bcl-2的实时PCR分析。b.Western blot分析MPC5细胞中Bcl-2的表达。western blot分析MPC5细胞中WT-1和nephrin的表达。d.Western blot分析MPC5细胞中cleaved caspase-3, Beclin-1, ATG7和p62。结果为三个独立实验的平均值±SEM。**P< 0.01， ***P < 0.001 vs NC。# # # P < 0.01, P < 0.05, # # # P < 0.001 vs HG。$ $ P < 0.01, $ $ $ P < 0.001 vs Bcl-2-OE组。HG高葡萄糖，MG5.5 mM葡萄糖加24.5 mM甘露醇，NCnormal对照组，Wog.汉黄芩素.

结论：本研究首次证实了汉黄芩素通过调节Bcl -2介导自噬和凋亡，在缓解肾小球病变和足细胞损伤方面的新作用。汉黄芩素可能是一种潜在的治疗DKD的药物。

原文出处：

Liu XQ,  Jiang L,  Li YY,et al,Wogonin protects glomerular podocytes by targeting Bcl-2-mediated autophagy and apoptosis in diabetic kidney disease.Acta Pharmacol Sin 2021 Jul 12;