J Ethnopharmacol：系统药理学揭示黄芪甲苷IV改善环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠免疫活性的机制

背景：骨髓抑制（BMS）是一种血细胞生成减少的病理现象，并进一步导致免疫稳态障碍。黄芪（AM）是一种在中国数千年的临床实践中具有益气和增强身体免疫力功效的中药。黄芪甲苷IV（AS-IV）是AM的主要活性成分，通过不同的方式在调节免疫系统中发挥着重要作用。

该研究旨在探讨AS-IV对体外巨噬细胞和体内环磷酰胺（CTX）诱导的免疫抑制小鼠的保护作用及其机制，为AS-IV在骨髓抑制中的预防和治疗提供实验依据。

方法：基于网络药理学和分子对接技术，筛选AM皂苷抗骨髓抑制的核心靶点和信号通路。通过体外细胞免疫活性和细胞分泌分析，研究AS-IV对RAW264.7细胞的免疫调节作用。通过RT-PCR和蛋白质印迹方法分析了AS-IV对HIF-1α/NF-κB信号通路主要潜在靶点的影响。

在免疫器官指标分析、组织病理学分析、血液学分析、自然杀伤细胞活性分析和脾淋巴细胞转化活性分析的基础上，对AS-IV对CTX诱导的小鼠的作用进行了综合分析。为了进一步验证活性成分与作用靶点之间的关系，最后进行了药物抑制剂实验。

结果：通过系统药理学方法筛选出AS-IV作为一种潜在的抗骨髓抑制化合物，可作用于包括HIF-1α和RELA在内的靶蛋白以及HIF-1α/NF-κB信号通路。分子对接技术的进一步研究表明，AS-IV与HIF1A、RELA、TNF、IL6、IL1B等核心靶点具有良好的结合活性。

细胞和动物实验验证结果表明，AS-IV可以增强RAW264.7细胞的迁移和吞噬作用，保护脾脏、胸腺等免疫器官以及骨组织免受损伤。通过这种方式，包括脾脏自然杀伤细胞在内的免疫细胞功能和淋巴细胞转化活性也得到了增强。

在被抑制的骨髓微环境（BMM）中，白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板和骨髓细胞也得到了显著改善。在动力学实验中，TNF-α、IL-6和IL-1β等细胞因子的分泌增加，IL-10、TGF-β1的分泌减少。HIF-1α/NF-κB信号通路中的关键调节蛋白如HIF-1α、NF-κB、PHD3也在蛋白或mRNA水平上调HIF-1α，p-NF-κBp65和PHD3的表达。

抑制实验结果表明，AS-IV可以显著改善免疫和炎症中的蛋白质反应，如HIF-1α、NF-κB和PHD3。

结论：AS-IV可显著缓解CTX诱导的免疫抑制，并可能通过激活HIF-1α/NF-κB信号通路提高巨噬细胞的免疫活性，为AS-IV作为一种潜在的BMM调节因子的临床应用提供了可靠的依据。

原始出处：

Yao J, Liu J, He Y, et al. Systems pharmacology reveals the mechanism of Astragaloside IV in improving immune activity on cyclophosphamide-induced immunosuppressed mice [published online ahead of print, 2023 Apr 24]. J Ethnopharmacol. 2023;116533. doi:10.1016/j.jep.2023.116533