揭秘升陷汤神奇疗效：网络药理学助力冠心病气虚血瘀证治疗机制大解密！

冠心病（CHD）是心血管领域极为常见的疾病之一，其主要病理过程涉及冠状动脉腔的狭窄、痉挛或阻塞，进而引发心肌缺血、缺氧乃至坏死。这种由冠状动脉狭窄或破裂所引发的慢性缺血状态以及心肌梗死，均有可能导致心力衰竭乃至生命的终结。

目前，针对冠心病的治疗药物主要着眼于单个靶点，诸如受体阻滞剂和血管紧张素转换酶抑制剂等。尽管这些药物在临床应用中展现出了一定的疗效，但不可避免地会产生副作用及耐药性。更为严峻的是，冠心病的发病率与死亡率呈现出逐年上升的趋势，且患者人群逐渐年轻化。这一现状使得寻找一种更为高效且安全的治疗方法对抗冠心病显得尤为重要。

升陷汤（SXD）是以补中益气汤为基础加减化裁而来。黄芪大补元气，又善升阳；升麻、柴胡升阳举陷，助黄芪举陷升提；知母凉润，制黄芪之温性；桔梗为药中舟楫，可载药上行，直达病所。诸药合用，共奏益气升陷之功。其主要化合物为黄酮类、酚酸、多糖、皂苷和氨基酸，与调节炎症因子、氧化还原酶、心血管指标等密切相关。根据代谢组学研究，SXD具有心脏保护作用，并参与能量和鞘脂类的代谢。

日前，一篇名为“Exploring the effective compounds and potential mechanisms of Shengxian Decoction against coronary heart disease by UPLC-Q-TOF/MS and network pharmacology analysis ”的文章揭示了升陷汤对冠心病气虚血瘀证的相关影响。

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SXD可改善冠心病模型大鼠的心肌损伤和炎症反应

研究分为冠心病模型组、SXD低剂量组（4.33g/kg）、SXD高剂量组（12.99g/kg）和Betaloc组（10mg/kg，Bet组）。假手术组（Sham组）为未结扎的大鼠，Sham组和冠心病模型组大鼠灌胃后给予等量的生理盐水。

冠心病模型组的HWI显著高于假手术组（图2A）。相较之下，Bet组和SXD组的HWI水平均呈现不同程度的下降态势。通过应用TTC染色法以评估心肌梗死面积，结果显示冠心病模型组的心肌梗死面积较假手术组显著增大，而经过SXD治疗后，心肌梗死面积则明显减小（图2B）。在冠心病模型组中，HE和Masson染色揭示心肌纤维存在严重坏死现象，并伴有炎症细胞浸润和组织结构紊乱。然而，Bet组和SXD组的组织纤维化程度和细胞损伤程度均呈现出明显的改善趋势（图2C）。

此外，与Sham组相比，冠心病模型组的血清IL-1β和IL-6水平显著升高（p<0.01）。相较于模型组，各给药组的血清IL-1β和IL-6水平均出现不同程度的下降（图2D）。同时，SXD还能对冠心病大鼠血清中的ALD、Ang II和NT-proBNP水平产生调节效应。综上所述，SXD能够有效降低冠心病大鼠的HWI，显著减轻心肌组织损伤，并降低血清炎症水平。

图2 SXD可显著减轻冠心病大鼠的心肌损伤和炎症反应

SXD能有效提高细胞活力，降低ROS的产生

为了精准地确定最具成效的心肌保护浓度，研究采用了MTT法进行试验分析。相较于对照组，经H/R诱导处理的心肌细胞展现出了较低的细胞活力（图3A）。然而，采用不同浓度（SXD，250μg/mL、500μg/mL和1mg/mL）预处理24小时后，心肌细胞的活力均显著增强（p<0.05），相较于H/R组具有明显优势。因此，研究选定250μg/mL、500μg/mL和1mg/mL这三个浓度的SXD，以进一步探讨其潜在的作用机制。

为验证SXD是否通过抗氧化活性实现对H9c2细胞的保护作用，该研究深入分析了细胞内ROS的产生情况（图3B）。H/R组的心肌细胞ROS水平明显高于对照组，表明H/R处理导致了明显的氧化应激反应（图3B）。尤其是，SXD预处理显著降低了H/R刺激下H9c2细胞中ROS的产生，这提示SXD可能通过其抗氧化特性，有效地减轻了H/R诱导的氧化损伤，进而保护心肌细胞免受伤害。

图3 SXD增加细胞活力，减轻H/R诱导的H9c2细胞损伤

SXD可保护H9c2细胞免受H/R诱导的心肌损伤

同时，为深入研究SXD的抗凋亡效果，研究采用了流式细胞术进行实验。结果表明，相较于对照组，H/R组细胞凋亡数量显著增多。然而，经过SXD预处理后，细胞凋亡率明显降低（p<0.01）。因此，SXD能够有效降低H/R诱导的细胞凋亡（图3C）。

此外，研究还对三种不同的促炎细胞因子（TNF、IL-6和IL-1β）进行了检测。数据显示，在SXD处理的H9c2细胞培养上清中，TNF、IL-6和IL-1β的含量较H/诱导的H9c2细胞显著降低（p<0.01）（图3D）。这充分证明，SXD能够显著抑制H/R刺激的H9c2细胞中TNF、IL-6和IL-1β的产生。

H/R诱导的细胞凋亡抑制过程中mRNA和蛋白的表达

为进一步揭示H/R诱导抑制细胞凋亡的分子机制，研究检测了TP53、caspase3以及细胞色素CmRNA的表达水平。H/R组中TP53的表达水平显著上调（p<0.01）。然而，在经过24小时的SXD处理后，无论是在500μg/mL还是1mg/mL的浓度下，TP53的表达均显著逆转（p<0.01）（图4A）。研究揭示了H/R诱导抑制细胞凋亡的分子机制，并通过对TP53、caspase3以及细胞色素C mRNA表达水平的检测，进一步证实了SXD在逆转这些表达水平上的显著效果。

此外，研究采用了免疫印迹分析技术，对调控细胞凋亡的关键分子——caspase3、caspase9以及细胞色素C的表达进行了系统分析。结果显示，与H/R诱导的H9c2细胞模型组相比，在SXD处理24小时后的细胞中，caspase3的表达，以及caspase9和细胞色素C的表达均呈现出显著下降的趋势，特别是在SXD浓度为1mg/mL的情况下（图4B）。

研究还对比了SXD处理的H9c2细胞与H/R诱导的H9c2细胞之间caspase3的活性差异。经过SXD处理的H9c2细胞培养上清中，caspase3的活性相较于H/R诱导的细胞明显降低（p<0.05）（图4C）。因此，SXD通过下调caspase3、caspase9和细胞色素C蛋白的表达水平，从抗凋亡的角度出发，显著缓解了心肌损伤。

图4 H/R介导的细胞凋亡抑制过程中mRNA和蛋白的表达

结论

SXD可能通过抑制炎症因子及促凋亡蛋白的表达来起到保护心肌细胞的作用，从而在冠心病所致的心肌损伤中发挥保护效应。尽管目前对其作用机制的深入验证尚待加强，但该研究成果为SXD的应用提供了一定的研究基础，并为冠心病心肌损伤的临床防治策略提供了新的视角与启示。

参考文献：

Zhou HM, Yue SJ, Wang WX, Zhang Q, Xu DQ, Li JJ, Tang YP, Yang XY. Exploring the effective compounds and potential mechanisms of Shengxian Decoction against coronary heart disease by UPLC-Q-TOF/MS and network pharmacology analysis. Heliyon. 2024 Apr 16;10(8):e29558. doi: 10.1016/j.heliyon.2024.e29558