项目简介
项目名称
环境雌激素对单细胞内雌激素受体作用的原位、动态、定量研究
项目批准号
21105058
学科分类
B050105
化学部
_分析化学
_色谱分析
_微纳流控系统与芯片分析
资助类型
化学科学
负责人
张鸿雁
依托单位
山东师范大学
批准年份
2011
起止时间
201201-201412
批准金额
25.00万元
摘要
本课题拟建立集单细胞进样、捕获、细胞孵育、荧光显微成像、溶膜、标记抗体-雌激素受体（ERα）复合物的电泳分离及激光诱导荧光在线检测等多个步骤于一体的微流控芯片平台，实现环境雌激素己烯雌酚作用前后，单个细胞内ERα分布和表达量的原位、动态、定量研究。采用带有围堰的芯片结构，静压力与电渗流驱动相结合的流控技术实现单细胞的进样捕获及各种溶液的顺序引入。采用两种不同颜色量子点标记的抗ERα抗体分别对己烯雌酚作用前后细胞内的ERα先后进行特异性识别和标记，并在对作用后细胞内的ERα进行标记时引入链霉亲和素-生物素，创新性地实现了既可提高方法的灵敏度，有利于新表达的少量ERα的成像与测定，又能使两种标记物的分子量差别拉大，有效地实现电泳分离的双重目的。此方法的建立将为分子水平上探究环境雌激素的生理作用、致癌机理，确定环境雌激素作用的"关键窗口"，并为肿瘤预警和早期诊断提供有效的分析方法。
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