对铝毒胁迫响应的水稻RCS1基因的功能研究

负责人:王玉琪

依托单位:华南农业大学

批准年份:2007

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项目简介
项目名称
对铝毒胁迫响应的水稻RCS1基因的功能研究
项目批准号
30700052
学科分类
C020407 生命科学部 _植物学 _植物生理学 _植物生长调节物质
资助类型
生命科学
负责人
王玉琪
依托单位
华南农业大学
批准年份
2007
起止时间
200801-201012
批准金额
16.00万元
摘要
半胱氨酸合酶(CS)催化半胱氨酸合成的最后一步反应,半胱氨酸除了可以用于蛋白质的合成外,还是一些含硫小分子代谢物(如GSH、MTs、PCs等)的前体物,这些小分子含硫代谢物在植物抗金属离子毒害中发挥重要作用。本研究克隆了一个水稻细胞质半胱氨酸合酶基因(RCS1),构建了该基因的原核表达载体,并诱导表达,分离纯化后制备了多克隆抗体,并对其表达特性进行了分析;构建了RCS1基因的上调和下调表达的植物双元表达载体,转化中花11水稻,通过潮霉素筛选和分子检测获得转基因植株,并对其后代进行纯合;用Real-time PCR分析了转基因植株中目的基因RCS1的表达情况,结果显示RCS1在过表达转基因植株中的表达量平均上调了5.45倍多,且半胱氨酸合酶活性平均提高了2.3;在干涉表达的转基因植株中表达量平均下调了67.5%,半胱氨酸合酶活性平均下调了17.2%;进一步的功能分析表明,过量表达RCS1能提高水稻对铝毒和镉胁迫的抗性,而干涉RCS1表达的转基因水稻对铝毒和镉胁迫更加敏感,说明半胱氨酸合酶在水稻抗重金属胁迫中发挥重要作用。
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