项目简介
项目名称
APMCF1在细胞周期调节中的相关分子的筛选及其作用机理的研究
项目批准号
30700283
学科分类
C140208
生命科学部
_植物保护学
_农业昆虫学
资助类型
生命科学
负责人
李擒龙
依托单位
中国人民解放军第四军医大学
批准年份
2007
起止时间
200801-201012
批准金额
17.00万元
摘要
Apmcf1是我们自主克隆的一个全新基因，结构分析表明其可能属于小G蛋白超家族，实验发现该基因的表达显著影响HHCC和HepG2的细胞周期，提示它很可能是一个细胞周期调节相关基因。本项研究包括：①基因芯片：采用细胞周期基因芯片，调查HHCC细胞系在转染Apmcf1基因后，CDC27等5种基因表达上调3倍以上，TIMP3等5种基因表达下调3倍以上。②酵母双杂交：通过筛选成人肝癌cDNA文库，并经过回转实验验证，得到了两个阳性实验结果。③His pull down实验：已进行到2D电泳，下一步将根据2D结果进行质谱分析。④采用两种预测软件成功预测出可能与APMCF1有相互作用的分子共20个，为下一步的验证实验提供了参考。⑤哺乳动物细胞内双杂交实验：采用CheckMate系统，构建了目的基因和多种目标分子的重组工具载体，包括酵母实验结果得到的候选分子，相关筛选工作仍在进行中。以上研究以及即将完成的实验可望找到在细胞周期调节中与其相关的基因、相互作用的蛋白分子，并阐明它们之间的相互调节关系和信号转导通路，最终明确Apmcf1在细胞周期调节中的作用机制，从而在认识其功能方面取得进展。
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