项目简介
项目名称
决定芥菜开花信号整合子命运的两个反式元件相互作用及其特异性介导结构域鉴定
项目批准号
31000908
学科分类
C150202
生命科学部
_园艺学与植物营养学
_蔬菜学与瓜果学
_蔬菜种质资源与遗传育种学
资助类型
生命科学
负责人
汤青林
依托单位
西南大学
批准年份
2010
起止时间
201101-201312
批准金额
19.00万元
摘要
在本室芥菜SVP与FLC体外原核蛋白表达和相互作用已有研究基础上，拟克隆决定芥菜开花信号整合子命运的反式元件编码基因SVP和FLC，分析其MIKC结构域等生物学信息；正确构建诱饵质粒pGBD-FLC与猎物质粒pGAD-SVP并转化酵母进行互作特性研究，载体互换重构质粒pGBD-SVP与pGAD-FLC并再次转化酵母验证，建立基于SVP与FLC互作的酵母双杂体系；同时分别扩增含MIKC结构域的SVP全长编码区及若干个含部分结构域的编码区并构建多个猎物质粒，与诱饵质粒pGBD-FLC共转化酵母筛选能介导SVP与FLC互作的结构域；载体互换酵母双杂验证以及移码突变实验验证，以确证该作用结构域的特异性。这为利用点突变或随机突变鉴定相互作用的氨基酸位点、根据特异性结构域和作用位点开发SVP-FLC蛋白复合物锁定或解聚的新型调控方法、决定开花信号整合子关闭（抑制开花）或开启（促进开花）等研究奠定基础。
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