项目简介
项目名称
一种植物来源的双功能蛋白N-糖苷酶/转谷氨酰胺酶的研究及其在合成糖蛋白中的应用
项目批准号
31000369
学科分类
C050204
生命科学部
_生物物理、生物化学与分子生物学
_生物化学
_糖生物化学
资助类型
生命科学
负责人
刘现伟
依托单位
山东大学
批准年份
2010
起止时间
201101-201312
批准金额
20.00万元
摘要
均一糖蛋白合成是糖蛋白功能研究和开发应用的基础。研究者在拟南芥基因组中发现一种属于转谷氨酰胺酶超家族的N-糖苷酶，重组表达时既表现蛋白脱N-糖基活性（催化酰胺键断裂），又表现蛋白交联活性（催化酰胺键生成）。我们拟对其进行原核和真核重组表达，并进行糖基化分析和获得脱糖基化真核重组蛋白。使用这些重组酶研究其活性影响因素和生化性质，阐明双重活性的主要决定条件、糖酰胺酶底物特异性、转酰胺酶酰基受体等。我们还将通过同源建模、点突变和截短突变研究重要氨基酸和两端非活性中心扩展结构域对两种酶活性的影响，揭示其催化机理。依据其所属蛋白超家族的催化机理、其可以催化酰胺键断裂和生成双重反应的事实，以及同属转谷氨酰胺酶超家族的半胱氨酸蛋白酶催化逆反应合成肽链的经验，我们推测此酶可以催化寡糖苷和肽链之间的交联反应。我们将探索通过激活底物、改变反应条件等策略实现转糖苷反应，为此酶应用于糖肽和糖蛋白合成奠定基础。
评论区 (0)
#插入话题
