项目简介
项目名称
多酚氧化酶的催化氧化机理研究
项目批准号
30270321
学科分类
C050203
生命科学部
_生物物理、生物化学与分子生物学
_生物化学
_酶学
资助类型
生命科学
负责人
解永树
依托单位
中国科学技术大学
批准年份
2002
起止时间
200301-200512
批准金额
19.00万元
摘要
为探求烟草多酚氧化酶催化活化氧分子到超氧自由基并经两步氧化多酚到醌的新机理而设立的本课题，由于多次实验难以捕捉到反应过程中的O2- 自由基理想的顺磁等信号，使我们的实验重点移向课题内的多酚氧化酶的二级结构和多酚氧化酶的变性、复性的研究。实验证明pH 对多酚氧化酶的α-螺旋，反平行和平行β-折叠有很大影响,而变性剂盐酸胍使α-螺旋，β-折叠大幅度降低，而无规则卷曲大幅度增加，这对掌握多酚氧化酶的相关生化实验条件具有普遍意义。同时发现盐酸胍对多酚氧化酶的变性和复性是一个二态过程，而外源Cu2+ 参与的盐酸胍对多酚氧化酶的变性和复性是一个三态过程，从测定的自由能数据可看出Cu2+ 的参与增大了多酚氧化酶的构象稳定性。这一结果对于蛋白质大分子结构变化的热力学过程提出了定量数据。同时，本项目也对多酚氧化酶的其他重要性质也进行了一定研究。上述研究结果也为我们进一步的机理研究扫清了一些障碍，为最终解决机理方面的问题奠定了基础。
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