项目简介
项目名称
高效表达幽门螺杆菌黏附素的嗜酸乳杆菌菌株的构建及其免疫保护作用的研究
项目批准号
31070812
学科分类
C080501
生命科学部
_免疫学
_免疫调节
资助类型
生命科学
负责人
龙北国
依托单位
南方医科大学
批准年份
2010
起止时间
201101-201312
批准金额
30.00万元
摘要
PCR扩增幽门螺杆菌保护性抗原黏附素基因hp0410，克隆入组成型表达穿梭质粒pMG36e中，通过电穿孔法将该重组质粒转化至嗜酸乳杆菌中，得到高效组成型表达，在体内外检测该重组质粒在嗜酸乳杆菌中的稳定性。将重组嗜酸乳杆菌免疫SPF级C57BL/6小鼠，采用ELISA法检测小鼠血清中特异性IgG类抗体和胃黏膜中SIgA类抗体的效价，ELISPOT和流式细胞术分析小鼠脾细胞Th1和Th2型细胞因子的水平，考察重组嗜酸乳杆菌诱发特异性免疫应答尤其是黏膜免疫的效果。用高致病性幽门螺杆菌SS1株分别攻击未经免疫和免疫后的SPF级C57BL/6小鼠，采用尿素酶试验、细菌分离培养、PCR扩增检测胃组织中的幽门螺杆菌，以及免疫组化实验检测胃组织炎症反应，考察重组嗜酸乳杆菌抗幽门螺杆菌感染的免疫保护效果。本项研究旨在为研制预防幽门螺杆菌感染的嗜酸乳杆菌活载体疫苗提供理论依据。
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