J Vis Exp：小鼠视网膜色素上皮细胞的原代细胞培养方案
2018-04-06 cuiguizhong MedSci原创
匹兹堡大学医学院眼科的Shang P近日在J Vis Exp发表了一项重要的工作，他们提出一种建立原代小鼠RPE细胞培养物的方案，包括眼球摘除和解剖，RPE片层的分离，获得用于培养的细胞，并在培养两周后显示出真正RPE细胞的某些原始性质。
匹兹堡大学医学院眼科的Shang P近日在J Vis Exp发表了一项重要的工作，他们提出一种建立原代小鼠RPE细胞培养物的方案，包括眼球摘除和解剖，RPE片层的分离，获得用于培养的细胞，并在培养两周后显示出真正RPE细胞的某些原始性质。
视网膜色素上皮细胞（RPE）是位于神经视网膜和眼脉络膜之间的高度极化的多功能上皮细胞。它是一个单层的有色细胞，通过紧密连接进行六边形连接。RPE的主要功能包括光吸收，感光细胞摆脱感光的外节段吞噬作用，离子的空间缓冲，转运营养、离子和水以及积极参与视觉周期。因为RPE细胞有如此重要而多样的功能，研究RPE细胞具有重要的生物学价值。
目前已经建立了许多RPE细胞系，然而，传代细胞和永生化细胞会迅速丧失天然RPE细胞的一些形态学和生理学特征。因此，原代细胞更适合研究RPE细胞的生物学和功能特征。因为小鼠模型广泛用于生物学研究，所以小鼠原代RPE细胞培养物对于研究人员非常有用。但从小鼠收集RPE细胞也存在诸多挑战，如它们的区域非常小。
在这里，研究人员提出一种建立原代小鼠RPE细胞培养物的方案，包括眼球摘除和解剖，RPE片层的分离，获得用于培养的细胞。这种方法可以高效地收集细胞。从两只小鼠获得的RPE细胞在培养一周后，在培养皿中的一个12mm聚酯膜上形成接触抑制，并且在两周后显示出真正RPE细胞的某些原始性质，例如六角形细胞形状和色素沉积特征。
原文出处：
Shang， P.， et al.， Primary Cell Cultures from the Mouse Retinal Pigment Epithelium. J Vis Exp， 2018(133).
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