Mol Med Rep：CRISPR/Cas9系统有效抑制鸭乙型肝炎病毒DNA水平
2017-09-28 MedSci MedSci原创
CRISPR/Cas9系统有效抑制鸭乙型肝炎病毒DNA水平
目前的治疗方法并不能清除乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)，由此导致HBV感染持续存在。近来，CRISPR/Cas9系统已被用作编辑病毒基因组的高效有力工具。鉴于鸭乙型肝炎病毒能够感染鸭原代肝细胞，这一模型已被广泛用来研究体外人乙型肝炎病毒感染。本研究旨在通过该模型，采用CRISPR/Cas9系统对DHBV DNA，特别是cccDNA，进行靶向抑制。
本研究共设计了6种针对对DHBV基因组的单导RNA (sgRNA16)。研究者将sgRNA/Cas9质粒转染到感染了鸭乙型肝炎病毒（DHBV）的鸭原代肝细胞（PDH）。采用逆转录定量聚合酶链反应检测培养基和PDH内的DHBV总DNA和cccDNA水平。同时也对CRISPR/Cas9和恩替卡韦(ETV)联合抑制进行了评估。
研究结果表明，两种sgRNAs，即sgRNA4和sgRNA6能够有效抑制PDHs内的DHBV总DNA（抑制率分别为77.23 %和86.51%）、cccDNA（抑制率分别为75.67%和85.34%），同时也能够抑制培养基内的DHBV总DNA，抑制率分别为62.17%和59.52%。将sgRNA/Cas9质粒转染到感染了鸭乙型肝炎病毒（DHBV）的鸭原代肝细胞（PDH）后，从第5天到第9天，抑制率保持此水平或抑制率增强。CRISPR/Cas9系统联合恩替卡韦进一步增强了对培养基和PDHs内DHBV总DNA的抑制，然而，并没有增强对cccDNA的抑制作用。CRISPR/Cas9系统有可能成为抑制DHBV DNA的有用工具。
原始出处：
Zheng Q， Bai L， Zheng S， et al. Efficient inhibition of duck hepatitis B virus DNA by the CRISPR/Cas9 system. Mol Med Rep， 2017， Sep 19. doi： 10.3892/mmr.2017.7518.
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