IGLH:抗凝血酶抵抗试验的优化

2018-05-30 MedSci MedSci原创

抗凝血酶抵抗(ATR)是一种新型的血栓风险。本研究建立了一种用于检测抗凝血酶活性的凝血酶原激活剂的人工ATR检测方法。然而,由于牛蛇毒的可用性和产力,这种测定方法是有限的。在此,我们改进了ATR检测方法,使用牛因子Xa和Va (FXa/Va)作为凝血酶激活剂,并对自动仪器(ACL TOP 500)进行了优化分析。 研究人员用凝血酶激活剂混合(磷脂、CaCl2和牛FXa/Va),然后在10、2

抗凝血酶抵抗(ATR)是一种新型的血栓风险。本研究建立了一种用于检测抗凝血酶活性的凝血酶原激活剂的人工ATR检测方法。然而,由于牛蛇毒的可用性和产力,这种测定方法是有限的。在此,我们改进了ATR检测方法,使用牛因子XaVa (FXa/Va)作为凝血酶激活剂,并对自动仪器(ACL TOP 500)进行了优化分析。

研究人员用凝血酶激活剂混合(磷脂、CaCl2和牛FXa/Va),然后在102030分钟内加入抗凝血酶,将稀释后的血浆进行培养。添加了一种增色基质S2238,并评估了在405nm处的吸光度/min的变化。此外还修改了ACL TOP 500的测试条件。

研究发现FXa/Va治疗的最佳条件为6.25%磷脂,5 mM CaCL2, 0.01 g/mL FXa0.1 g/mL FVa。采用FXa/Va激活剂的ATR assay动力学与在杂合子重组血浆中的Ox激活剂与重组野生型或抗凝血酶原抗凝血酶的比较。使用ACL500,FXa/Va处理的最佳条件为10.0%磷脂,5 mM CaCl2, 0.02 g/mL FXa0.2 g/mL FVa。采用FXa/Va激活剂的自动ATR检测表明,在血浆中抗凝血酶抗凝血酶具有良好的可检测性。

我们采用FXa/Va激活剂对ATR进行了优化,并对ACL500进行了分析。实验表明,在人工和自动化的过程中,能够清楚地检测出抗凝血酶的抗凝血酶。

原始出处:

S. TamuraY. Suga, et. al.Optimisation of antithrombin resistance assay as a practical clinical laboratory test: Development of prothrombin activator using factors Xa/Va and automation of assay  

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