J Ethnopharmacol：基于网络药理学的温中补肾方改善小鼠卵巢储备功能下降的作用及机制研究

背景：卵巢储备减少(DOR)的发病可能与遗传因素、环境暴露、自身免疫性疾病或医源性因素(如化疗或放疗)有关。治疗DOR的临床方法包括激素替代疗法、辅助生殖技术和生活方式干预。然而，这些方法在适用性、成本、明显的副作用和潜在危害方面存在局限性。目前，对于DOR的病因、发病机制或标准化的诊断和治疗方案尚无共识。因此，寻求有效治疗DOR仍然是生殖医学领域的一个紧迫挑战。

在中医理论中，DOR属于不孕症的范畴，通常与肾虚有关。温中补肾方(WZBSF)是一种传统的中医经验方，以其补气、健脾、温肾，升阳、调节血液循环、平衡月经的作用而闻名。临床证据表明其通过改善卵巢储备来治疗卵巢储备减少(DOR)，疗效显著。然而，WZBSF的具体药理机制尚不清楚。

研究目的：通过网络药理学和动物实验的方法，探讨WZBSF改善卵巢储备功能下降的作用机制。

方法：WZBSF采用UPLC-MS/MS和GC-MS双平台进行分析。从TCMSP数据库中获得WZBSF的有效成分和靶点，并使用UniProt进行标准化。从GeneCard、OMIM、PHARMGKB和DisGeNET数据库中收集疾病靶标，并在两组靶标之间进行交叉参考。利用Cytoscape3.9.1和STRING数据库构建PPI蛋白相互作用网络，利用metscape数据库进行KEGG和GO富集分析。

最后，建立小鼠卵巢储备功能下降模型，给予不同剂量的WZBSF，并通过血清激素检测、H&E染色、免疫荧光(IF)、免疫组织化学(IHC)和Western blot分析(WB)进行实验验证。

结果：WZBSF与卵巢储备功能下降有145个共同靶点。GO富集分析显示如对激素刺激的反应和磷酸酶结合等生物过程，而KEGG分析则涉及PI3K-AKT信号通路和FoxO信号通路。

在卵巢储备能力下降的小鼠中，WZBSF可恢复体重增加率，提高卵巢指数，使动情周期正常化，逆转血清激素失衡，恢复各种卵泡计数，改善卵巢形态。此外，WZBSF降低p-AKT和p-FOXO3a水平，防止原始卵泡过度激活，维持卵巢储备。

结论：WZBSF可改善环磷酰胺和白消安诱导的卵巢储备能力下降，其机制可能与抑制PI3K/AKT/FOXO3a信号通路有关。

原始出处：

Liang X, Xie H, Yu L, et al. Study on the effects and mechanisms of Wenzhong Bushen Formula in improving ovarian reserve decline in mice based on network pharmacology. J Ethnopharmacol. Published online January 11, 2024. doi:10.1016/j.jep.2024.117756