JCLA：重组链霉亲和蛋白融合蛋白作为快速检测丙型肝炎病毒感染的信号转导蛋白
2019-07-15 gladiator 网络
丙型肝炎病毒(HCV)感染得早期诊断对该病的治疗非常重要。因此，研制灵敏、特异的快速检测方法对该病的诊断也具有重要意义。在这里，我们描述了一种很有前景的方法，使用金‐标记的链霉亲和蛋白融合蛋白作为新的信号报告蛋白，用于快速检测丙型肝炎病毒感染。 在表达载体pMAL‐5CX和pET28中克隆了与大肠杆菌麦芽糖结合蛋白(MBP)或部分细菌翻译起始因子2融合的链霉亲和素重组基因，并在适当的大肠杆菌
丙型肝炎病毒(HCV)感染得早期诊断对该病的治疗非常重要。因此，研制灵敏、特异的快速检测方法对该病的诊断也具有重要意义。在这里，我们描述了一种很有前景的方法，使用金‐标记的链霉亲和蛋白融合蛋白作为新的信号报告蛋白，用于快速检测丙型肝炎病毒感染。
在表达载体pMAL‐5CX和pET28中克隆了与大肠杆菌麦芽糖结合蛋白(MBP)或部分细菌翻译起始因子2融合的链霉亲和素重组基因，并在适当的大肠杆菌宿主菌株中转化。基因诱导和链霉亲和素融合蛋白，并分别命名为M‐STV和IF-STV，亲和色谱法纯化纯度90%以上。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测M‐STV和IF‐STV的生物素结合活性。M‐STV被标记为胶体金纳米颗粒，并作为信号报告，将其用于开发一种基于横向流动的快速测试，用于检测人体血液样本中的抗HCV抗体。
研究发现，M‐STV与商业链霉亲和素相比，具有略高的生物素‐结合活性和类似的结合特异性。金‐标记的M‐STV与生物素分子特异性结合，以剂量响应的方式固定在快速测试条带上，并成功用于检测丙型肝炎病毒感染患者血清样本中的丙型肝炎病毒抗体。快速检测显示出比金‐标记的商业NeutrAvidin更高的检测灵敏度。
我们的研究结果表明，金‐标记的M‐STV是一种有前途的快速检测丙型肝炎病毒感染以及其他病毒感染的试剂。
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