Stroke：细胞外囊泡相关指标，可辅助诊断短暂缺血发作

短暂性脑缺血发作（TIA）的传统定义：由血管引起的突发性局灶性神经功能障碍，持续时间<24小时。

有短暂症状和梗死证据的患者可被归类为有短暂神经系统症状的脑梗死。无论定义如何，TIA的诊断是具有挑战性的，因为缺乏一个黄金标准。诊断过程主要基于临床病史，而且血管神经科医生之间的评分可靠性很差。

为了克服这些困难，精确诊断评分（Precise Diagnostic Score，PREDISC）是一个结构良好的评分工具，由标准化的临床和神经影像元素组成，可以更客观地辨别有TIA可疑症状的患者，并且具有良好的评分者间的一致性。为了改善诊断过程，可靠的生物标志物是一个先决条件。TIA的诊断性生物标志物已被研究，但没有一个潜在的候选物达到足够的准确性用于TIA诊断。

细胞外囊泡（EVs）是新的有希望的生物标志物候选物。EVs是分泌的纳米大小的颗粒，在细胞间的交流中发挥着重要作用，并参与到与脑血管疾病相关的众多生物机制中，如免疫反应、炎症和凝血过程。较高的内皮细胞和血小板来源的EVs水平与中风的诊断和预后有关，然而，关于TIAs患者的数据很少。目前，没有一项研究探讨EVs作为TIA潜在生物标志物的诊断性能。

藉此，MD, Neurocenter of Southern Switzerland的Jacopo Burrello等人，探究了可疑TIA症状的患者的EVs表面抗原谱（surface-antigen profile）。考虑到缺乏诊断TIA的可靠金标准，他们使用PREDISC评分对患者进行了准确的选择。并采用了一种综合方法（基于临床评估、磁共振成像[MRI]和EV表面标志物）来识别TIA，以开发和验证基于特定EV表面抗原谱的短暂性缺血事件诊断的预测模型。

他们分析了40名有疑似TIA症状的受试者和20名来自训练队列（training cohort）的健康对照组。一个由28名受试者组成的独立队列作为外部验证(external validation)。根据发生真正缺血事件的可能性对患者进行分层，使用Precise Diagnostic Score评分，定义为：不太可能（0-1分），可能-可能（2-3分），或非常可能（4-8分）；即unlikely (score 0-1), possible-probable (score 2-3), or very likely (score 4-8）。

通过纳米颗粒追踪分析对血清囊泡进行量化，并通过多重流式细胞仪对EV表面抗原谱进行表征。

他们发现：与对照组相比，非常可能或可能（very likely or possible-probable TIA）的TIA患者的EV浓度增加（P<0.05）。

纳米颗粒浓度与精确诊断评分直接相关（R=0.712；P<0.001）。在EV免疫捕获后，CD8、CD2、CD62P、黑色素瘤相关硫酸软骨素蛋白多糖、CD42a、CD44、CD326、CD142、CD31和CD14被确定为组间判别因素。

ROC曲线分析证实，这些标志物中的每一个单独使用，以及从它们的线性组合中得到的复合标志物具有可靠的诊断性能（曲线下面积为0.851）。

最后，在训练和外部验证队列中，结合所选标记物的表达水平的随机森林模型对极有可能发生TIA的患者的区分准确率分别达到96%和78.9%。

这个研究的重要意义在于发现了：与症状不太可能由脑缺血引起的患者相比，被判定为非常可能由脑缺血引起的短暂症状的患者的EV-表面抗原谱似乎有所不同。这个提出的基于EV-表面抗原特异性特征的算法，可能有助于TIA的识别。

Burrello J, Bianco G, Burrello A, et al. Extracellular Vesicle Surface Markers as a Diagnostic Tool in Transient Ischemic Attacks. Stroke. Published online August 4, 2021. doi:10.1161/STROKEAHA.120.033170