OMCL：益肾排毒方通过抑制小鼠氧化应激、炎症和上皮-间充质转化起到对糖尿病肾损伤的保护作用

目的：糖尿病肾病(DKD)是糖尿病最常见的慢性微血管并发症之一，但目前尚缺乏有效的治疗策略。益肾排毒方(YSPDF)是一种中药制剂，临床用于治疗慢性肾脏病(CKD)已有20多年的历史。然而，YSPDF对DKD是否有治疗作用尚无研究。

方法：本研究通过建立高糖(HG-)诱导的肾损伤细胞模型，观察益肾排毒方对 2型糖尿病DKD模型db/db小鼠的影响，并揭示其作用机制。

结果：养肾排毒方能明显改善大鼠的各项生化指标(空腹血糖、血肌酐、血尿素氮、24h尿总蛋白、总胆固醇、总甘油三酯)，改善肾组织病理改变和肾组织纤维化。此外，还能明显抑制氧化应激状态和炎性细胞因子(TNF-α、IL-6、IL-1β和单核细胞趋化蛋白-1)水平。养肾排毒方治疗可显著减轻肾纤维化，有证据表明这是通过抑制转化生长因子-β-1/Smad通路抑制上皮向间充质转化而实现的。有趣的是，服用YSPDF后，已知与氧化应激相关的蛋白Nrf2、HO-1和NQO1的表达显著增加。YSPDF治疗组NLRP3炎症体蛋白NLRP3、ASC、caspase-1和裂解caspase-1水平降低。细胞实验表明，益肾排毒方能抑制HG暴露的HK-2细胞的EMT和NLRP3炎性小体，其机制可能与激活Nrf2有关。

表 YSPDF能提高db/db小鼠的各项生化指标水平。

图1 养肾排毒方对小鼠肾脏组织病理学改变的影响。(A)肾组织HE染色、PAS染色和Masson染色的典型图像(400倍)。每条标示50μm。(B)PAS染色显示肾小球损伤，Masson染色显示肾小管间质纤维化。蓝色箭头表示肾小球，黑色箭头表示肾小管。数据为：平均±扫描电镜；n=3；#与正常对照组比较P<0：001；∗∗与弥漫性肾病组比较P<0：01。

图2 YSPDF可改善db/db小鼠的氧化应激状态。(A)氧化应激参数包括活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)。用IPP法测定DHEs的荧光强度，结果用DHE阳性区域的荧光强度与DAPI的比值表示。(2)DHE染色(400倍)测定ROS水平。每条线表示50μm，白色箭头表示肾小球，黄色箭头表示肾小管。与正常对照组比较，##p<0：01和##p<0：001；与糖尿病肾病组比较，∗p<0：05，∗∗p<0：01，∗∗∗p<0：001。

图3 YSPDF可抑制INB/DBM小鼠炎症因子的产生。用ELISA法检测促炎因子TNF-α、IL-6、IL-1β、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)，与正常对照组比较#p<0：05和##p<0：001，与糖尿病肾病组比较∗p<0：05，∗∗p<0：01，∗∗∗p<0：001。

结论：我们的研究表明，养肾排毒方可能通过抑制氧化应激、炎症和EMT而减轻db/db小鼠的肾损伤，其机制可能与激活Nrf2途径有关。

原文出处：

Zhang Q,  Liu X,  Sullivan MA,  Shi C,  Deng B,db/dbProtective Effect of Yi Shen Pai Du Formula against Diabetic Kidney Injury via Inhibition of Oxidative Stress, Inflammation, and Epithelial-to-Mesenchymal Transition in  Mice.Oxid Med Cell Longev 2021;2021