J Ethnopharmacol：血浆外泌体蛋白质组分析发现柴胡龙骨牡蛎汤治疗颞叶癫痫的相关蛋白标记物

背景：柴胡龙骨牡蛎汤(CLMD)和解清热、镇惊安神，几个世纪以来在中国被广泛用于治疗神经精神疾病，包括癫痫、痴呆、焦虑、失眠和抑郁。

该研究旨在分析CLMD治疗颞叶癫痫(TLE)患者血浆外泌体中的差异表达蛋白(DEPs)，探讨TLE的生物标志物及CLMD治疗TLE的潜在靶点。

方法：采集正常人群和TLE患者在奥卡西平(OXC)及奥卡西平联合CLMD(OXC.CLMD)治疗前血浆外泌体。外泌体通过超离心从血浆中分离，然后通过透射电镜(TEM)、纳米颗粒跟踪分析(NTA)和流式细胞术进行鉴定。

对DEPs进行蛋白质组学分析，然后进行基因本体(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)途径富集分析。Western blot检测关键基因蛋白表达水平。

建立氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠模型，OXC单药治疗、OXC.CLMD和CLMD单药治疗(低剂量和高剂量)。采用H&E染色、Nissl染色、Western blot检测海马齿状回神经元损伤及脑组织核糖体蛋白L6 (RPL6)表达。

结果：蛋白质组学分析显示，四组患者血浆外泌体中存在多种DEPs；DEPs在癫痫相关功能和通路中富集。筛选出了4种关键蛋白，包括RPL6、核仁蛋白(NCL)、载脂蛋白A1 (APOA1)和乳酸脱氢酶A (LDHA)。

其中，TLE患者血浆外泌体中RPL6、NCL、LDHA蛋白水平下调，APOA1蛋白水平上调。在OXC和OXC.CLMD处理后，RPL6、NCL、LDHA蛋白水平升高，APOA1蛋白水平降低。此外，与OXC治疗后相比，OXC.CLMD处理后RPL6蛋白水平进一步升高。

在TLE大鼠模型中，海马齿状回神经元变性和坏死增加，RPL6表达水平下降。OXC、OXC.CLMD和CLMD治疗后，神经元变性坏死减少，RPL6表达水平升高；CLMD治疗后RPL6表达明显上调。

结论：RPL6、NCL、LDHA和APOA1是TLE患者治疗前后血浆外泌体中的DEPs。RPL6可能是CLMD治疗TLE的潜在生物标志物。

文献来源：

Yang P, Huang Y, Zhu Y, Wang Q, Guo Y, Li L. Plasma exosomes proteome profiling discovers protein markers associated with the therapeutic effect of Chaihu-Longgu-Muli decoction on temporal lobe epilepsy [published online ahead of print, 2023 Jul 19]. J Ethnopharmacol. 2023;116928. doi:10.1016/j.jep.2023.116928.