Korean J Ophthalmol：甲状腺眼病的促甲状腺素受体自身抗体评估:检测类型重要吗？

背景：甲状腺眼病(TED)可表现为若干体征，包括眼球突出、暴露性角膜病变和压迫性视神经病变。虽然TED的发病机制仍不完全清楚，但眼眶成纤维细胞起着关键作用。在TED患者中，这些细胞比普通成纤维细胞表达更高水平的促甲状腺素受体(TSHR)和胰岛素样生长因子-1受体。可在TED患者中检测到的循环甲状腺受体自身抗体通过这些受体发挥作用，并与临床活动相关联，可预测和指示随时间推移的病程。这种抗体介导的信号通过这种受体导致成纤维细胞增殖和分化为肌成纤维细胞和脂肪细胞。这种级联反应通过与T细胞的相互作用刺激过量的糖胺聚糖产生、细胞因子和活性氧的释放，导致组织水肿眼眶扩张。

疾病活动性和甲状腺抗体水平根据疾病的自然史而波动；一种被称为朗德尔曲线的模式。活动增加，达到最大值，然后减少并保持稳定，有所改善，但没有回到基线。平均而言，非吸烟者的活跃期持续12个月，TSHR结合抑制抗体(TRAb)水平正常化的平均时间为18.5±6.5个月，吸烟者为2-3年。在未经治疗的患者中，活动高峰在13至24个月之间。患者特征影响朗德尔曲线。在吸烟患者中，TRAb的正常化延迟了近一年，而接受免疫抑制治疗的患者正常化更快。虽然甲状腺刺激免疫球蛋白(TSI)被认为是Graves病的主要免疫致病原因，但尚不清楚TED的免疫致病机制是否是由于单独的抑制性和刺激性或刺激性抗体。文献与抗体命名法的报告以及所用检测的类型和世代不一致，阻碍了比较和正式的荟萃分析。目前有三种生化试验来定量抗体水平:竞争试验、生物试验和应用桥技术的试验。竞争分析，也称为TSH结合抑制免疫球蛋白(TBII)分析，是使用最广泛的三代分析方法。

第一代TBII检测使用自身抗体能力来阻止放射性标记的TSH与猪甲状腺提取物的结合。这些测定使用重组TSHR进行了改进，但最终被第二代测定所取代，第二代测定利用固相上的固定化TSHR，并具有荧光检测而非放射性检测。第三代分析用标记的人单克隆甲状腺刺激抗体M22代替标记的TSH，该抗体与TRAb竞争结合固定的TSHR。TSHR抗体生物测定法是一种基于细胞的测定法(例如甲状腺素生物测定法)，其通过测量由TSI与TSHR结合介导的环磷酸腺苷的诱导来直接评估甲状腺刺激抗体的功能。虽然这可以区分刺激性和封闭性抗体，但由于在连续组织培养中维持细胞系需要较长的周转时间和较高的劳动强度，因此成本高且耗时长。2016年，西门子推出了一种新的自动桥检测法，用于检测刺激性TSHR自身抗体。该试验利用了一种嵌合受体，该受体含有结合刺激性免疫球蛋白的TSHR的表位。电桥测定是全自动的，周转时间快，所需劳动力最少，因此更经济，因此在我们的实验室引入，以取代更昂贵、费力的勃拉姆斯第二代发光测定。TBII和生物测定与临床活动评分(CAS)显著正相关，但TSI可能在评估肌肉限制和炎症方面具有优势。Eckstein等人表明，TBII值< 2.3提供了超过15倍的良好TED病程的机会，而高于8.7的结果导致严重病程的风险增加3 1倍。

在引入新的TSI桥接免疫分析后，我们试图将这种新分析的结果与第二代TRAb分析的结果进行比较。据我们所知，我们的研究首次评估了采用桥接技术的下一代TSI检测与第二代TBII竞争性检测(Brahms Kryptor TRAK检测，Thermofisher Scientific)之间的临床活性和生化关系。

目的：我们通过测量TED患者人群中的CAS来评估临床活动，帮助我们评估临床设置的有效性。

方法：回顾性调查了100名连续接受区域专家服务的患者。对于每一位患者和每一次就诊，都进行了TRAb和TSI，并记录了临床活动评分(CAS)。

结果：TRAb与TSI呈显著正相关(rho = 0.828，p < 0.01)，而与CAS相关性较弱(TRAb: rho = 0.439，p < 0.01；TSI: r = 0.357，p < 0.01)。在10%的偶发性数据中，患者的TRAb水平不成比例地高(39.41±52。IU/L)，相比之下，他们的TSI水平(9.53 12。IU/L)高于平均CAS(2.47±1.78；范围，0–5)。在诊断后的12个月内，CAS与TRAb (rho = 0.503，p < 0.01)以及CAS与TSI (rho = 0.329，p < 0.01)呈显著正相关。在诊断超过12个月的患者中，TSI和TRAb与CAS的相关性分别为Spearman等级相关系数0.347 (p < 0.01)和0.327 (p < 0.01)。

图1 第二代促甲状腺素受体结合抑制抗体(TRAb)和促甲状腺素免疫球蛋白(TSI)之间的比较，插入趋势线显示与Spearman等级相关系数为0的强正相关。828 (p < 0.01)对于图形演示，TRAb的值> 40被标准化为40。

图2 促甲状腺素受体结合抑制抗体(TRAb)和促甲状腺免疫球蛋白(TSI)与临床活动评分(CAS)的比较。(A)总分析显示正相关(分别为ρ= 0.439和ρ= 0.357；p < 0.01)。(B)对诊断患有甲状腺眼病< 12个月的患者的亚分析(分别为rho = 0.503和rho = 0.329p < 0.01)。(C)诊断为甲状腺眼病≥12个月的患者的亚分析(分别为rho = 0.347和rho = 0.327p < 0.01)。

结论：TRAb和TSI与CAS密切相关，但相关程度较低。对大多数患者来说，TRAb可以用更经济的TSI替代。与TSI相比，TRAb与新诊断的更活跃的患者也有更好的相关性。在一部分患者中，封闭抗体可能起重要的致病作用，需要不同的治疗和监测。需要进一步的研究来调查这种关系。

原文出处：Moledina M,  Roos J,  Murthy R,Thyrotropin Receptor Autoantibody Assessment in Thyroid Eye Disease: Does the Assay Type Matter?Korean J Ophthalmol 2023 Apr;37(2)