J Ethnopharmacol：结合网络药理学揭示中药复方二至丸刺激黑色素形成的作用机制

背景：黑色素的丧失会导致皮肤颜色下降，甚至出现白斑，引起的疾病包括白癜风。因疾病产生的焦虑和抑郁等情绪严重影响患者的生活质量。白癜风目前无法治愈，但像准分子光、局部使用他克莫司和吡美莫司这样的治疗可以提供美容上可接受的重新着色。然而，在停止治疗的1年内，有近40%的复发率。因此，开发出更有效的疾病相关黑色素生成刺激药物，对白癜风治疗意义重大。

二至丸(EZP)由女贞子、旱莲草组成，其使用可追溯到明代，用于治疗由“肝肾虚”引起的各种疾病。中医认为“肝肾虚”是白癜风的关键机制，EZP用于治疗白癜风已经显示出良好的疗效。然而，利用EZP治疗白癜风属于中医理论指导下的经验医学，其促进白癜风黑色素形成的药理基础和作用机制尚不明确

研究目的：探讨EZP促进黑色素形成的药理基础和作用机制。

方法：采用UHPLC-TOF-MS法测定口服EZP后血清中吸收的植物化学物质。利用网络药理学方法预测EZP的致黑活性的潜在靶点和通路，构建“化合物-靶点-通路”网络。以斑马鱼和B16F10细胞为实验材料，研究了EZP对酪氨酸酶活性和黑色素含量的影响。采用Western blot和ELISA分析验证EZP对黑色素形成相关蛋白的影响，包括MITF、TYR、CREB、p-CREB和cAMP。

结果：UHPLC-TOF-MS分析鉴定出血清样品中36个来源于EZP的化合物。网络药理学预测揭示了89个目标蛋白与鉴定的化合物相关，并与白癜风密切相关。GO和KEGG分析表明cAMP/PKA信号通路参与了EZP促进黑色素形成的过程。

实验结果表明，EZP可提高斑马鱼和B16F10细胞的酪氨酸酶活性和黑色素含量，但不产生毒性。Western blot和ELISA结果提示，EZP的黑素生成作用可能与cAMP/PKA信号通路的激活有关。这些结果证实了血清药理学与网络药理学相结合的可行性。

结论：EZP可能通过激活cAMP/PKA通路，提高斑马鱼和细胞中酪氨酸酶活性和黑色素含量。

原始出处：

Hong SW, Wang YF, Chen YJ, et al. Integrative pharmacology reveals the mechanisms of Erzhi pills, A traditional Chinese formulation, stimulating melanogenesis. J Ethnopharmacol. Published online December 22, 2023. doi:10.1016/j.jep.2023.117617